仿土蛋雞J亞型禽白血病的感染狀態(tài)評估及其來源探究.pdf

1、禽白血病是由禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus，ALV)引起的禽類（主要是雞）各種良性和惡性腫瘤的一種疾病。ALV根據(jù)病毒的囊膜蛋白與病毒的宿主特異性相關(guān)的gp85蛋白抗原性的不同分為A～J10個亞群，只有A、B、C、D、E和J亞群能感染雞，J亞型禽白血病病毒(ALV-J)最初來自商品代肉雞，目前已經(jīng)成為流行最廣泛的外源性病毒之一。在我國，黑龍江、北京、江蘇、遼寧、廣東、廣西、上海、內(nèi)蒙古、山東、河南、寧夏等地區(qū)都有

2、J亞型禽白血病發(fā)生。其發(fā)病死亡率有些高達(dá)30％～40％。而且該病已開始向黃雞、麻雞等我國地方品種蔓延，給養(yǎng)雞業(yè)生產(chǎn)帶來了極大的危害，并給我國地方品種雞群的保種和選育工作帶來了極大的挑戰(zhàn)。
　　 本研究對仿土蛋雞群J亞型禽白血病的感染狀態(tài)進(jìn)行評估并對其來源進(jìn)行了探究。
　　 隨機(jī)采集45日齡仿土蛋雞泄殖腔棉拭子30份，用ELISA試劑盒檢測p27抗原，另60日齡時從該雞群中隨機(jī)無菌采集6份抗凝血，離心取其白細(xì)胞接種CEF，

3、培養(yǎng)10d后用間接免疫熒光(IFA)試驗進(jìn)行ALV-J的鑒定;結(jié)果表明:45日齡仿土蛋雞泄殖腔棉拭子ALVp27抗原陽性檢出率為87％(26/30);60日齡時采集的6份抗凝血，IFA試驗表明ALV-J的陽性率為100％(6/6)。而鑒于仿土蛋雞母本京紅1號是已凈化的優(yōu)良品種，因此無菌采集其父本華潤土公雞的抗凝血2份，離心取其白細(xì)胞接種CEF培養(yǎng)，并采用IFA試驗進(jìn)行ALV-J的鑒定，熒光顯微鏡下發(fā)現(xiàn)華潤土公雞的2份抗凝血中均存在ALV

4、-J的陽性信號。
　　 跟蹤該雞群至115日齡調(diào)查其產(chǎn)蛋性能，并隨機(jī)抓取10只母雞剖檢觀察其病變發(fā)生情況，同時取剖檢的病變組織肝、脾制作石蠟切片，分別用FITC和羅丹明標(biāo)記的二抗作IFA試驗，對組織切片中ALV-J進(jìn)行抗原定位檢測。發(fā)現(xiàn):整個雞群超過110日齡的開產(chǎn)日期均不產(chǎn)蛋，隨機(jī)剖檢10只母雞，均表現(xiàn)為胸腺、法氏囊萎縮，卵巢未發(fā)育，腺胃乳頭出血，部分雞只肝臟、脾臟腫大，肝臟可見豆粒大血皰。IFA試驗顯示，肝、脾組織切片中均存

5、在ALV-J的抗原陽性信號。
　　 同時，提取4份來自仿土蛋雞和2份來自其父本華潤土公雞的ALV-J分離株的cDNA，通過PCR方法擴(kuò)增gp85基因，對來自仿土蛋雞和其父本華潤土公雞的ALV-J分離株的gp85基因的遺傳變異分析。分析結(jié)果表明:分離自仿土蛋雞的4株ALV-J之間的同源性為98.6％～99.9％，與其父本華潤土公雞的2株ALV-J分離株的同源性最高達(dá)99.7％。
　　 本研究顯示，該仿土蛋雞群普遍存在ALV