泰山松花粉多糖對雞混合感染B亞型禽白血病病毒和禽波氏桿菌的免疫調理作用.pdf

1、禽胚胎性疾病是一類由多種病原引起的綜合性疾病，可造成雞胚發(fā)育受阻，孵化率降低，死亡率升高等，給養(yǎng)禽業(yè)造成重大的經(jīng)濟損失，其中以傳染性胚胎病危害最嚴重。禽波氏桿菌病(Bordetellosis)是最近幾年發(fā)現(xiàn)的一種禽的新型細菌性胚胎性疾病，它能引起雞胚和雛雞的急性死亡、孵化率降低(10％-40％)，及成年雞的眼炎等。而禽白血病(Avian Leukosis，AL)不但是一種重要的免疫抑制病，也是一種主要的病毒性胚胎性疫病。近幾年，養(yǎng)禽業(yè)中

2、多種病原混合感染的現(xiàn)象普遍存在，在胚胎性疾病中禽白血病病毒(ALV)和禽波氏桿菌(B.avium)混合感染的現(xiàn)象也越來越普遍。由于感染后癥狀、病變不典型，導致疾病的防控更加困難。由于動物食品藥物殘留和食品安全問題的存在，所以開發(fā)和研究新型植物免疫增強劑勢在必行。本研究選擇泰山松花粉多糖(TPPPS)作為免疫增強劑用于B.avium和B亞型禽白血病病毒(ALV-B)的混合感染中，為控制免疫抑制性病毒與細菌的混合感染提供理論依據(jù)和技術支持，

3、為減少抗生素的使用，生產(chǎn)綠色安全的畜禽產(chǎn)品奠定良好的基礎。本研究內容主要分為以下三部分:
　　1、雞胚胎性疫病病原的分離鑒定
　　2011年，遼寧鐵嶺某種雞孵化場出現(xiàn)孵化率降低、死淘率升高的現(xiàn)象。本實驗室通過細菌分離培養(yǎng)進行菌落形態(tài)、培養(yǎng)特征、生化特性及血清學鑒定等對該孵化場送檢的病死雞胚和雛雞進行了細菌學檢測。最終檢出B.avium、奇異變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和沙門氏菌，其中B.avium和奇異變形桿菌的檢出率分別高

4、達76.44％和61.36％，二者混合感染率為51.83％。本研究通過分子生物學檢測，采用病原菌23S rRNA基因的共同保守序列設計的一對引物，以及根據(jù)臨床常見致病菌16S-23S rRNA基因間隔序列(ISR)兩端的16S rRNA和23S rRNA保守序列設計的一對通用引物，分別對其中兩株分離率較高的菌株進行了PCR擴增，并對其DNA序列進行了測定。結果顯示，所得到的DNA片段與GenBank中收錄的登錄號為HM545299的B.

5、avium和登錄號為AY993943的奇異變形桿菌相應核苷酸序列同源性分別高達99.5％和98.7％。另外，本研究通過ALVp27抗原檢測試劑盒對禽白血病病毒(ALV)進行了檢測，ALV的檢出率為6.12％。本研究最終確定了B.avium與ALV的混合感染在養(yǎng)禽業(yè)中的存在，給養(yǎng)禽業(yè)造成了一定的經(jīng)濟損失。
　　2、TPPPS對ALV-B所致雞免疫抑制條件下混合感染B.avium的免疫調理作用
　　病毒（尤其是免疫抑制性病毒）和

6、B.avium的混合感染，在養(yǎng)禽業(yè)中已經(jīng)存在，造成的經(jīng)濟損失越來越嚴重，嚴重威脅著養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。另外，由于藥物殘留和食品安全問題越來越嚴重，所以新型植物免疫增強劑的開發(fā)和研究勢在必行，正逐漸成為國內外養(yǎng)禽業(yè)研究的新熱點。本研究中分別設計了ALV-B+B.avium組，ALV-B+B.avium+ TPPPS組，B.avium單獨感染組，B.avium+TPPPS組和試驗對照組，對TPPPS的免疫調節(jié)作用進行了研究。相關指標的檢測結果顯示

7、，ALV-B對抗體的產(chǎn)生、淋巴細胞比率、淋巴細胞的轉化、IL-2和IFN-γ的合成和分泌等造成了明顯的抑制作用，并且延長了B.avium的病程，增強了其致病性。在TPPPS的免疫調理作用下，明顯緩解了ALV-B造成的免疫抑制，提高了雛雞的體液免疫和細胞免疫水平?？傊?，TPPPS對混合感染ALV-B和B.avium的雛雞發(fā)揮了免疫調理作用，增強了機體的免疫機能。通過本試驗的研究，為TPPPS作為新型高效的免疫調節(jié)劑應用于免疫抑制性病毒與細

8、菌混合感染的防治提供了理論依據(jù)。
　　3、TPPPS對胚胎期間混合感染ALV-B和B.avium雛雞的免疫調理作用
　　近些年雞胚混合感染免疫抑制性病毒和B.avium的現(xiàn)象逐年增加。由于藥物殘留和食品安全問題逐漸顯現(xiàn)，新型安全的免疫增強劑，尤其是植物多糖的研究已逐漸成為養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展中研究的熱門話題。本研究選擇300枚SPF雞胚，分別設計了ALV-B和B.avium混合感染組，B.avium單獨感染組，試驗對照組。隨機抽取混合

9、感染后孵出的部分雛雞注射TPPPS作為免疫調理對象，并與單獨感染組進行比較和分析。研究結果顯示混合感染組的各項檢測指標均顯著低于B.avium單獨感染組。同時，B.avium的致病性增強，且病程延長。經(jīng)TPPPS調理后，提高了出殼前混合感染B.avium與ALV-B的病弱雛的存活率和雛雞質量，促進了機體的生長和免疫器官的發(fā)育，提高了病弱雛的存活率和對疾病的抵抗力。因此，考慮到在免疫機能和生產(chǎn)性能方面的積極作用，發(fā)現(xiàn)TPPPS能夠作為免疫