2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:采用高效液相色譜法(HPLC)篩選了竹節(jié)參皂苷中具有免疫佐劑效果的有效部位,進(jìn)而研究并探討了此有效部位作為HBsAg抗原佐劑的作用及可能機(jī)制,為竹節(jié)參皂苷作為免疫佐劑的開發(fā)研究奠定基礎(chǔ)。
  方法:⑴通過D101大孔吸附樹脂和HPLC進(jìn)行竹節(jié)參皂苷成分的初步分離和分析;⑵體外無菌分離小鼠脾淋巴細(xì)胞,培養(yǎng)、給藥,MTT法檢測(cè)不同濃度乙醇洗脫的竹節(jié)參皂苷中具有最佳免疫佐劑活性的部位;⑶取6周雌性Balb/c小鼠54只,隨機(jī)分為6

2、組,每組9只:正常組(Z)、抗原組(HBsAg,5μg/只)、抗原+60%乙醇洗脫的竹節(jié)參皂苷低劑量組(HBsAg+60%低,300μg/只)、抗原+60%乙醇洗脫的竹節(jié)參皂苷高劑量組(HBsAg+60%高,600μg/只)、抗原+人參皂苷rg1低劑量組(HBsAg+rg1低,50μg/只)、抗原+人參皂苷rg1高劑量組(HBsAg+rg1高,100μg/只);分別在第0、7和21天皮下接種疫苗,各組分別給予生理鹽水、HBsAg、HBs

3、Ag+60%低、HBsAg+60%高、HBsAg+rg1低和HBsAg+rg1高,末次免疫7天后頸椎脫臼處死老鼠;CCK-8法檢測(cè)抗原HBsAg和ConA誘導(dǎo)小鼠淋巴細(xì)胞增殖的情況;間接ELISA法檢測(cè)小鼠血清中IgG、IgG1和IgG2b抗體滴度;RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10的表達(dá)量;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面蛋白TLR4和TLR9的表達(dá)。
  結(jié)果:①實(shí)現(xiàn)了竹節(jié)參皂苷中各段物質(zhì)的分離及確定了

4、各段竹節(jié)參皂苷中所含的主要成分:30%段皂苷為極性較強(qiáng)的糖類物質(zhì),60%段皂苷為齊墩果烷型皂苷和達(dá)瑪烷型皂苷,90%段幾乎全部為齊墩果烷型皂苷;②MTT法初步確定了竹節(jié)參皂苷中60%段具有最強(qiáng)的免疫活化活性(P<0.01);③竹節(jié)參皂苷和人參皂苷rg1能夠增強(qiáng)HBsAg抗原誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖(P<0.05);竹節(jié)參皂苷和人參皂苷rg1能夠顯著增強(qiáng)小鼠血清中抗HBsAg的IgG、IgG1和IgG2b亞型抗體滴度(P<0.05);竹節(jié)參

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