利谷隆致胚胎期SD大鼠睪丸發(fā)育整體基因表達(dá)水平的研究.pdf

1、目的:探索利谷隆致雄性子代SD大鼠的生殖毒性及可能的分子機(jī)制。
　　 方法:用花生油溶解利谷隆,濃度為24mg/ml,于SD大鼠孕期妊娠第12-17天連續(xù)每天以120mg/kg的劑量(1.5ml/只)灌胃染毒,并以花生油灌胃為對(duì)照組,待到孕期妊娠第21天解剖妊娠母鼠子宮獲得子鼠。雄性子代SD大鼠生長(zhǎng)至性成熟后進(jìn)行精子分析,然后取睪丸、前列腺、附睪、精索等組織進(jìn)行蘇木精.伊紅染色觀察組織發(fā)育情況:雄性子代SD大鼠生長(zhǎng)至性成熟后取睪

2、丸組織進(jìn)行透射電子顯微鏡觀察病理改變。取雄性SD胎鼠睪丸組織提取總RNA進(jìn)行基因表達(dá)譜芯片雜交,尋找利谷隆灌胃染毒雄性子代SD大鼠睪丸組織中差異表達(dá)基因并對(duì)其作基因本體論及基因表達(dá)產(chǎn)物參與的通路分析。
　　 結(jié)果:本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與花生油灌服對(duì)照組比較,利谷隆灌服組雄性子代SD大鼠性成熟以后,經(jīng)精子分析發(fā)現(xiàn)精液中精子數(shù)量顯著性低于花生油灌服對(duì)照組個(gè)體(P＜0.01)且頂體有明顯變化畸形;HE染色檢測(cè)雄性子代SD大鼠生殖組織睪丸、前列腺

3、、附睪及精索等發(fā)現(xiàn)利谷隆灌服組睪丸組織中部分生精小管結(jié)構(gòu)破壞,生精細(xì)胞及精子溢出,伴少量淋巴細(xì)胞,漿細(xì)胞浸潤(rùn);精索組織中部分管腔內(nèi)分泌物蓄積,管腔擴(kuò)張;透射電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)利谷隆灌服組睪丸組織中間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)異常,線粒體腫脹并伴隨著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張?；蛐酒磉_(dá)譜改變分析表明,與花生油灌服對(duì)照組比較,利谷隆灌服組的雄性子代SD大鼠睪丸組織中有168個(gè)差異表達(dá)基因,89個(gè)基因表達(dá)上調(diào),79個(gè)基因表達(dá)下調(diào),其中參與睪酮合成相關(guān)基因有StAR,P4

4、50scc,3β-HSD,ABP,5α-R,Cox7a2等及參與細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡相關(guān)基因有c-myc,S6K,Apafl,TSCl等;生物學(xué)過(guò)程(biologicalprocess)分析發(fā)現(xiàn)有6個(gè)差異表達(dá)基因參與生殖(reproduction)過(guò)程;通路分析表明差異表達(dá)基因產(chǎn)物主要參與了PI3K、AMPK、胰島素信號(hào)通路、mTOR信號(hào)通路等信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程。
　　 結(jié)論:本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明利谷隆可能是通過(guò)改變睪丸發(fā)育相關(guān)基因及睪酮合成