Zbtb38過(guò)表達(dá)對(duì)小鼠脊髓損傷的修復(fù)機(jī)理研究.pdf

1、脊髓損傷（SCI）是以脊髓受損部位以下知覺(jué)、活動(dòng)機(jī)能幾乎全部喪失為表型的嚴(yán)重創(chuàng)傷，造成脊髓神經(jīng)元大量損失，造成機(jī)體修復(fù)能力與促修復(fù)因子的缺失，通常都是由于戰(zhàn)爭(zhēng)與交通意外引起的后果，往往伴隨著復(fù)雜生理學(xué)進(jìn)程的同時(shí)也會(huì)發(fā)生相關(guān)基因表達(dá)的差異。目前還沒(méi)有使患者完全恢復(fù)的治療方法，阻止繼發(fā)性損傷的方法，促進(jìn)軸突再生并最終達(dá)到改善功能的結(jié)果對(duì)脊髓損傷后的修復(fù)非常重要。為此，本實(shí)驗(yàn)組前期已運(yùn)用mRNA差異顯示技術(shù)從大量基因表達(dá)圖譜中篩選出SCI過(guò)程

2、中相關(guān)差異表達(dá)的基因，發(fā)現(xiàn)CIBZ蛋白在小鼠模型中經(jīng)線粒體途徑參加脊髓損傷的過(guò)程。
　　本研究從小鼠組織中提取總RNA，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄并擴(kuò)增出目的基因Zbtb38，測(cè)序確認(rèn)后通過(guò)四質(zhì)粒系統(tǒng)包裝成慢病毒，檢測(cè)達(dá)到活體注射所要求的滴度即可進(jìn)行注射。小鼠需建立脊髓損傷模型，檢測(cè)注射后小鼠的行為學(xué)表現(xiàn)和細(xì)胞凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因的表達(dá)。尾靜脈注射后的斜板測(cè)試結(jié)果與運(yùn)動(dòng)機(jī)能評(píng)分結(jié)果顯示出相似的變化趨勢(shì)，SCI組與治療組的測(cè)試評(píng)分明顯比空白組要低

3、，并且治療組在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)分組的評(píng)分都顯著比SCI組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的分組評(píng)分高。熒光定量PCR結(jié)果顯示相比較于SCI組，治療組的Zbtb38表達(dá)量顯著增高，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激基因Chop和ERdj4表達(dá)量顯著降低，促凋亡基因Bim、Bax、Bak和Puma的表達(dá)量明顯降低，抑凋亡基因Bcl2的表達(dá)量剛好相反，明顯增高，但這種降低和增高的顯著性都是在4d和8d時(shí)表現(xiàn)出來(lái)，2d時(shí)都不明顯。由此可見(jiàn)，尾靜脈注射過(guò)表達(dá)Zbtb38慢病毒能夠使小鼠體內(nèi)Zbtb