新型自組裝短肽對心肌梗死組織修復功能的研究.pdf

1、本論文研究新型自組裝短肽構建的水凝膠納米纖維支架對心肌細胞三維培養(yǎng)，心肌梗死區(qū)域組織修復以及誘導骨髓間充質(zhì)細胞誘導分化為心肌樣細胞功能的影響。從材料層面上，圓二色譜儀考察了自組裝短肽的二級結構；原子力顯微鏡檢測短肽自組裝過程中的微觀形態(tài)；從細胞層面上，紅細胞溶血實驗來分析不同濃度的水凝膠對細胞膜的裂解作用；將自組裝形成的納米纖維支架作為心肌細胞三維培養(yǎng)材料，觀察心肌細胞的生長狀況；通過免疫熒光技術研究具有c-kit+性質(zhì)的心肌細胞存活能

2、力；從動物層面上，建立大鼠心肌梗死模型，分析加入水凝膠對心肌梗死修復的效果；蘇木精-伊紅染色以及免疫組化實驗觀察短肽水凝膠對心肌梗死修復的影響；從研究短肽對細胞誘導作用層面，以心肌裂解液作為心肌細胞誘導劑，研究新型自組裝短肽對骨髓間充質(zhì)細胞誘導分化為心肌樣細胞的作用；以及檢測不同濃度的短肽水凝膠對心肌誘導因子的控釋效果探討可能存在的機制。結果發(fā)現(xiàn)，該新型自組裝短肽的二級結構以β折疊為主；在自組裝過程中，24小時后可形成較為致密的納米纖維

3、網(wǎng)狀水凝膠結構；細胞三維培養(yǎng)實驗表明心肌細胞在水凝膠中生長狀態(tài)良好，心肌細胞三維培養(yǎng)中Notch1基因的mRNA水平相對表達量比二維細胞培養(yǎng)高~5倍；可緩解心肌梗死區(qū)域組織壞死面積，促進梗死區(qū)c-kit+細胞數(shù)量增多并使梗死區(qū)出現(xiàn)新生組織；短期內(nèi)促進骨髓間充質(zhì)細胞誘導分化成為心肌樣細胞的趨勢；以及短肽水凝膠對不同誘導因子有這一定的控釋能力，在濃度為2.5 mg/ml的短肽中控釋心肌裂解液的主要成分達到65%。綜上所述，本論文研究的新型自