新型自組裝短肽對心肌梗死組織修復(fù)功能的研究.pdf

1、本論文研究新型自組裝短肽構(gòu)建的水凝膠納米纖維支架對心肌細(xì)胞三維培養(yǎng)，心肌梗死區(qū)域組織修復(fù)以及誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞功能的影響。從材料層面上，圓二色譜儀考察了自組裝短肽的二級結(jié)構(gòu)；原子力顯微鏡檢測短肽自組裝過程中的微觀形態(tài)；從細(xì)胞層面上，紅細(xì)胞溶血實(shí)驗(yàn)來分析不同濃度的水凝膠對細(xì)胞膜的裂解作用；將自組裝形成的納米纖維支架作為心肌細(xì)胞三維培養(yǎng)材料，觀察心肌細(xì)胞的生長狀況；通過免疫熒光技術(shù)研究具有c-kit+性質(zhì)的心肌細(xì)胞存活能

2、力；從動物層面上，建立大鼠心肌梗死模型，分析加入水凝膠對心肌梗死修復(fù)的效果；蘇木精-伊紅染色以及免疫組化實(shí)驗(yàn)觀察短肽水凝膠對心肌梗死修復(fù)的影響；從研究短肽對細(xì)胞誘導(dǎo)作用層面，以心肌裂解液作為心肌細(xì)胞誘導(dǎo)劑，研究新型自組裝短肽對骨髓間充質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞的作用；以及檢測不同濃度的短肽水凝膠對心肌誘導(dǎo)因子的控釋效果探討可能存在的機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該新型自組裝短肽的二級結(jié)構(gòu)以β折疊為主；在自組裝過程中，24小時后可形成較為致密的納米纖維

3、網(wǎng)狀水凝膠結(jié)構(gòu)；細(xì)胞三維培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明心肌細(xì)胞在水凝膠中生長狀態(tài)良好，心肌細(xì)胞三維培養(yǎng)中Notch1基因的mRNA水平相對表達(dá)量比二維細(xì)胞培養(yǎng)高~5倍；可緩解心肌梗死區(qū)域組織壞死面積，促進(jìn)梗死區(qū)c-kit+細(xì)胞數(shù)量增多并使梗死區(qū)出現(xiàn)新生組織；短期內(nèi)促進(jìn)骨髓間充質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化成為心肌樣細(xì)胞的趨勢；以及短肽水凝膠對不同誘導(dǎo)因子有這一定的控釋能力，在濃度為2.5 mg/ml的短肽中控釋心肌裂解液的主要成分達(dá)到65%。綜上所述，本論文研究的新型自