二肽基肽4激活ERK1-2-NF--KB信號(hào)通路誘導(dǎo)人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞鈣化的研究.pdf

1、目的：探討可溶性二肽基肽4(soluble Dipep-tidyl peptidase4，sDPP4)促進(jìn)人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(Human aortic smooth muscle cells，HASMCs)鈣化的機(jī)制。
　　方法：在這項(xiàng)研究中，我們通過茜素紅及Von kossa染色探索了DPP-4對(duì)人血管平滑肌細(xì)胞(HVSMC)的鈣化影響。隨后，將人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組（正常培養(yǎng)），陽性對(duì)照組（β-甘油磷酸），低濃度

2、干預(yù)組(25ng/ml，DPP4)，高濃度干預(yù)組（200ng/ml，DPP4），高濃度+陽性對(duì)照組（DPP4+β-甘油磷酸），檢測(cè)各組細(xì)胞鈣化蛋白表達(dá)，最后再隨機(jī)分為對(duì)照組（正常培養(yǎng)），干預(yù)組（200ng/ml，DPP4），JNK抑制劑組(SP600125)、P38抑制劑組(SB203580)、ERK1/2抑制劑組(PD98059)和NF-KB抑制劑組(BAY11-7082)后，Western-blot法檢測(cè)各組細(xì)胞OPG，OPN，BM

3、P2，RUNX2蛋白表達(dá)水平;最后通過檢測(cè)ERK1/2和NF-KB磷酸化時(shí)間，得出相關(guān)通路的關(guān)系。
　　結(jié)果：茜素紅染色及及Von kossa染色結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，DPP4干預(yù)組鈣化結(jié)節(jié)明顯增多，且與鈣化組相當(dāng);且DPP4組OPG，OPN，RUNX2，BMP2蛋白表達(dá)水平成濃度，時(shí)間依賴性，DPP4干預(yù)下在15Min，500ng/ml時(shí)，P-ERK1/2表達(dá)明顯增高(P＜0.05);抑制劑組與DPP4組與相比，抑制劑組O

4、PG，OPN，RUNX2，BMP2表達(dá)均明顯降低(P＜0.05)。sDPP4組較對(duì)照組鈣化結(jié)節(jié)明顯增多;ERK1/2抑制劑組(PD98059)和NF-KB抑制劑組(BAY11-7082)較陽性對(duì)照組的OPG(38.41％，18.41％)，OPN(41.81％，61.58％)，RUNX2(44.21％，59.4％)，BMP2(48.3％，52.19％)蛋白表達(dá)水平明顯降低;400ng/ml sDPP4干預(yù)15min，P-ERK1/2表達(dá)明

5、顯增高(548.28％，372.55％);400ng/mlsDPP4干預(yù)60min，P-NF-κB表達(dá)明顯增高(431.83％，207.63％);sDPP4處理60min時(shí)，sDPP4+ERK1/2組P-NF-κB明顯降低(45.45％)，且N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine，NAC)組P-ERK1/2(0.03％)和P-NF-KB(48.15％)均下降。
　　結(jié)論：DPP4促進(jìn)人VSMC鈣化的鈣化，其可能的