西黃丸對人腎母細(xì)胞瘤SK--NEP--1細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制的探討.pdf

1、腎母細(xì)胞瘤又稱腎混合瘤、胚胎瘤、Wilms瘤，1814年Rance最先描述該類腫瘤，Max Wilms于1899年進(jìn)一步描述其特點(diǎn)，故稱Wilms瘤。它是最常見的小兒惡性實(shí)體腫瘤之一，占兒童腎臟腫瘤的95％，小于15歲的年發(fā)病率約為7～10/10萬，超過80％的腎母細(xì)胞瘤患者年齡在5歲以下，平均發(fā)病年齡為3.5歲，發(fā)病高峰約為3～4歲。
　　腎母細(xì)胞瘤的發(fā)病是一個復(fù)雜的多基因調(diào)控的過程，其發(fā)病涉及多個基因，其中WT1基因的缺失在其

2、發(fā)病過程中起著重要的作用。WT1基因被證實(shí)只存在于腎臟、生殖腺以及心臟中。相關(guān)動物實(shí)驗(yàn)中，WT1基因的突變會導(dǎo)致泌尿和生殖系統(tǒng)的發(fā)育畸形，僅僅一個WT1基因的缺失就可導(dǎo)致泌尿和生殖系統(tǒng)的異常。另外，WT2基因，以及其他染色體的異常都對腎母細(xì)胞瘤的發(fā)生有著重要的影響。
　　最初，經(jīng)腹膜腎切除是治療腎母細(xì)胞瘤的唯一手段。1960年，長春新堿和阿霉素被發(fā)現(xiàn)治療腎母細(xì)胞瘤有效，化療藥物開始被應(yīng)用于腎母細(xì)胞瘤的治療。目前，經(jīng)腹或腹腔鏡手術(shù)聯(lián)

3、合術(shù)后化療是治療腎母細(xì)胞瘤的常規(guī)方案。但是隨著化療藥物的不斷研發(fā)與使用，腫瘤細(xì)胞對藥物的耐藥性不斷增加。同時，由于化療藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時也一定程度的殺傷了人體的正常細(xì)胞，由此產(chǎn)生了各種各樣的副作用。
　　西黃丸又名犀黃丸，是中藥抗腫瘤名方。有研究表明，西黃丸可以抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞等多種腫瘤細(xì)胞，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于乳腺癌等疾病的治療。目前尚未有研究探討其對腎母細(xì)胞瘤是否有作用，因此本研究通過實(shí)驗(yàn)的方法探究了西黃丸對人腎母細(xì)

4、胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的作用并對其可能的機(jī)制進(jìn)行了探討。
　　目的:
　　本研究旨在研究中藥抗腫瘤名方西黃丸對人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的增殖和凋亡的影響，以及其作用機(jī)制的討論。
　　方法:
　　1.實(shí)驗(yàn)材料:制備西黃丸浸提液，并按照實(shí)驗(yàn)需求將西黃丸浸提液進(jìn)行稀釋或濃縮以配制成不同濃度的實(shí)驗(yàn)用液。
　　2.實(shí)驗(yàn)方法:分別采用MTS法、流式細(xì)胞儀和Western blot檢測不同濃度的西黃丸浸提液對人

5、腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞增殖抑制率、凋亡率以及Bax蛋白和Bcl-2蛋白表達(dá)水平的影響。
　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS21.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）的形式表示，數(shù)據(jù)的關(guān)聯(lián)性采用Pearson相關(guān)性分析，多組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.作用7

6、2h后，各濃度西黃丸組人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的增殖抑制率均高于對照組，且隨著西黃丸浸提液濃度的增加，其增殖抑制率也不斷增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.作用48h后，各濃度西黃丸組人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的凋亡率均高于對照組，且隨著西黃丸浸提液濃度的增加，其凋亡率也不斷增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.作用24h后，各濃度西黃丸組人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的Bax蛋白的

7、相對表達(dá)量均高于對照組，且隨著西黃丸浸提液濃度的增加，其相對表達(dá)量也不斷增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。各濃度西黃丸組人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的Bcl-2蛋白的相對表達(dá)量均低于對照組，且隨著西黃丸浸提液濃度的增加，其凋亡率也不斷降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.西黃丸可以降低人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的增殖率，即西黃丸可以抑制人腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1細(xì)胞的增殖。