格列本脲對膠質母細胞瘤增殖生長的影響及機制研究.pdf

1、目的：
　　腫瘤是嚴重危害人類健康的四大疾病（心臟病、腫瘤、腦血管病、阿爾茨海默病）之一，由細胞異常分化、增殖形成，化療作為治療腫瘤的主要手段，常常引起眾多副反應，如：免疫功能極其低下、骨髓功能受到抑制等，并且在化療過程中，患者還出現對藥物的耐藥性，這更增加了醫(yī)療上治療的難度。星形膠質瘤是腫瘤中常見類型，按照其病理學特點，世界衛(wèi)生組織將其分為四個病理級別，其中膠質母細胞瘤是Ⅳ級，屬于高惡性膠質瘤，侵襲性較強，發(fā)病率極高，且術后容易

2、復發(fā)，致死率高，目前臨床治療效果不盡如意。因此，研究膠質瘤的發(fā)病機制并探尋新的治療手段迫在眉睫。
　　方法：
　　本課題使用藥物格列本脲作用膠質瘤細胞U251和U87,初步探索其對U251和U87的影響及機制研究。應用CCK8、劃痕法、Transwell遷移與侵襲、Hocheset染色、流式細胞檢測、pH探針、蛋白免疫印跡（Western Blot）等多種分子生物學和電生理學實驗技術，檢測格列本脲對膠質瘤U251和U87細胞

3、增殖生長的影響及機制。體外培養(yǎng)人膠質瘤U251和U87細胞，隨機分為實驗組及對照組。利用不同濃度的格列本脲作用于體外培養(yǎng)的U251和U87細胞，共培養(yǎng)48 h，以未加入格列本脲的細胞組別為對照組，CCK8測定細胞的增殖能力。劃痕法及Transwell觀察細胞遷移和侵襲。Hocheset染色及流式細胞術檢測細胞凋亡變化。pH探針觀察細胞內酸堿度改變。Western Blot檢測細胞中Kir4.1和MCT1的表達水平
　　結果：

4、>　　CCK8顯示在一定濃度范圍內，格列本脲可抑制細胞增殖(P＜0.05)，并呈濃度依賴性(P＜0.05)；劃痕法顯示格列本脲抑制細胞遷移(P＜0.05)，Transwell法顯示實驗組遷移與侵襲細胞數量明顯減少(P＜0.05)，且隨著藥物濃度增高細胞數量逐漸減少(P＜0.05)；Hochest法及流式檢測顯示實驗組出現明顯凋亡特征，且隨著格列本脲濃度的升高，凋亡現象越明顯(P＜0.05)；熒光探針顯示隨著藥物濃度的增加，熒光強度逐漸減