DAPT抑制Notch信號通路對神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 1、以人神經(jīng)母細胞瘤細胞系SH-SY5Y為研究對象，利用γ-分泌酶抑制劑DAPT抑制細胞Notch信號通路，觀察其對SH-SY5Y細胞增殖的影響。 2、研究γ-分泌酶抑制劑DAPT對SH-SY5Y細胞Notch信號通路節(jié)點分子Notchl和Hesl表達的影響 3、探究在SH-SY5Y細胞中Notch信號通路與核因子NF-kB信號通路存在的相互聯(lián)系及其可能機制。 方法: 以不同濃度DAPT對

2、SH-SY5Y細胞處理后，MTT增殖實驗比較各處理組細胞增殖情況，得出最佳藥物作用濃度及最佳作用時間；以此藥物濃度和作用時間處理細胞，并以RT-PCR、Western blotting技術(shù)檢測與細胞增殖相關(guān)的部分基因表達變化情況。 結(jié)果: 1、DAPT可抑制SH-SY5Y細胞的增殖，且作用具有濃度和時間依賴性。 2、5μM DAPT可有效阻斷SH-SY5Y細胞Notch信號通路，藥物處理48小時后，NICD，He

3、sl表達減少，且NF-kB組分之一p65及其下游與細胞增殖有關(guān)靶基因Cyclin D1，Bcl-2表達亦有明顯的減少。 結(jié)論: 1、DAPT可有效阻斷Notch信號通路的傳導，抑制人神經(jīng)母細胞瘤細胞系SH-SY5Y細胞的增殖。 2、在SH-SY5Y細胞，Notch信號被阻斷后，可引起NF-kB家族最常見成員之一p65表達減少，且使其下游靶基因Cyclin D1、Bcl-2表達減少，表明Notch信號通路與核因子N

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