養(yǎng)肺通絡(luò)法干預(yù)Notch信號通路防治肺纖維化的機(jī)制研究.pdf

1、肺纖維化是多種肺部疾病的最終病理結(jié)局，臨床主要表現(xiàn)為進(jìn)行性加重的呼吸困難、限制性通氣障礙伴彌散功能降低、低氧血癥以及影像學(xué)上的雙肺彌漫性病變。鑒于本病目前尚缺乏特效療法，加之近年來發(fā)病率逐年升高，肺纖維化已經(jīng)成為急需攻克的醫(yī)學(xué)難點(diǎn)之一。根據(jù)本病的臨床癥狀及發(fā)病特點(diǎn)，本研究認(rèn)為肺纖維化屬于“絡(luò)病”范疇，肺虛絡(luò)阻是其主要病機(jī)，治宜養(yǎng)肺通絡(luò)。因此，本研究對養(yǎng)肺通絡(luò)法在肺纖維化中的運(yùn)用進(jìn)行了系統(tǒng)、深入的文獻(xiàn)及理論探討，在此基礎(chǔ)上，圍繞與肺纖維化

2、關(guān)系密切的Notch信號通路為著眼點(diǎn)，采用臨床驗方“養(yǎng)肺活血方”，對其作用機(jī)制進(jìn)行了實驗研究。
　　本研究主要分為三部分:第一部分為文獻(xiàn)研究，主要闡述了肺纖維化的中西醫(yī)研究概況和Notch信號通路的相關(guān)內(nèi)容。肺纖維化系西醫(yī)學(xué)病名，可由職業(yè)污染、感染病原微生物、藥物副作用等多種致病因素引起，其形成過程可概括為肺泡的免疫炎癥反應(yīng)、肺實質(zhì)損傷和肺纖維化三個階段，治療上目前無特效療法，仍以糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等傳統(tǒng)藥物治療為主，但長期使

3、用副作用明顯。而中醫(yī)藥以其安全、有效、副作用小的優(yōu)點(diǎn)，在該病的防治中顯示出越來越多的優(yōu)勢。中醫(yī)學(xué)中沒有與肺纖維化相對應(yīng)的名稱，其相關(guān)癥狀描述散見于“咳嗽”、“喘證”、“肺脹”、“肺痿”、“肺痹”諸病之中。感受外邪，內(nèi)傷久病等多種原因均可導(dǎo)致肺纖維化，但多因虛起病，病位在肺，涉及脾腎，痰瘀互結(jié)，虛實夾雜。現(xiàn)代醫(yī)家根據(jù)本病的病機(jī)特點(diǎn)和病理演變，以分期、分型、專病專方辨證施治，其作用機(jī)制涉及抑制炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)代謝、干預(yù)細(xì)胞凋亡、調(diào)控

4、血管新生等多種途徑。肺纖維化的發(fā)生發(fā)展涉及到多條信號通路，而Notch是新近發(fā)現(xiàn)的與該病關(guān)系密切的一條信號通路，其廣泛存在于生物體中，可通過炎癥反應(yīng)、細(xì)胞外基質(zhì)代謝、微血管新生、免疫反應(yīng)、氧化應(yīng)激等多種途徑影響肺纖維化的發(fā)生發(fā)展，因此本研究從Notch信號通路的角度探討?zhàn)B肺通絡(luò)法防治肺纖維化的作用機(jī)制。
　　第二部分為理論研究，主要對肺纖維化的有關(guān)理論進(jìn)行探討。認(rèn)為本病的病位在肺絡(luò)，氣陰兩虛是發(fā)病的病理基礎(chǔ)，肺絡(luò)瘀阻是其基本病變，

5、故本病以肺虛絡(luò)阻為主要病機(jī)，其病理性質(zhì)大多虛實夾雜，因而提出養(yǎng)肺通絡(luò)法是肺纖維化的重要治法。以養(yǎng)肺（益氣養(yǎng)陰）通絡(luò)為治療原則，不僅符合肺纖維化的病機(jī)特點(diǎn)，而且益氣以助行血，養(yǎng)陰以助行瘀，配伍活血通絡(luò)，可協(xié)同增效。臨床上，運(yùn)用養(yǎng)肺通絡(luò)法治療肺纖維化，首先應(yīng)明確主癥，并以辨虛實寒熱為主要辨證要點(diǎn)。鑒于本病虛實夾雜、氣血皆病的狀況，該法在選方用藥時應(yīng)遵循通補(bǔ)兼施，養(yǎng)中寓通的基本規(guī)律。同時，立足主法，靈活變化，根據(jù)病邪的性質(zhì)與病程中的兼夾因素，

6、隨證配合他法以綜合施治，如清化痰熱、滋補(bǔ)腎陰等，方能盡快控制肺間質(zhì)纖維化的病變，以促使機(jī)體早日康復(fù)。
　　第三部分為實驗研究。為了進(jìn)一步深入揭示養(yǎng)肺通絡(luò)法防治肺纖維化的作用機(jī)制，本研究采用臨床驗方“養(yǎng)肺活血方”為代表方，從Notch信號通路的角度，觀察了養(yǎng)肺活血方對肺纖維化大鼠病理形態(tài)、Notch受體及配體、活化酶及其相關(guān)分子的影響。結(jié)果表明，養(yǎng)肺活血方能顯著改善肺纖維化大鼠的肺泡炎和肺纖維化程度，有效防治肺纖維化。其作用機(jī)制與下

7、調(diào)Notch1、NICD1、Notch4、Jagged1、Dll4的表達(dá)有關(guān)，提示該方可通過干預(yù)Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來防治肺纖維化。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，該方能夠抑制Notch信號通路激活的經(jīng)典途徑“三步酶切過程”過程，這可能是其影響Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的途徑之一。在此基礎(chǔ)上，還觀察了該方對炎癥相關(guān)因子黏附分子、水通道蛋白等的作用。結(jié)果顯示，該方能顯著下調(diào)黏附分子ICAM-1、VCAM-1，上調(diào)水通道蛋白AQP1、AQP5的表達(dá)，表明其防治肺纖維