介導(dǎo)小鼠肺氣腫與肺纖維化的Notch信號表達(dá)模式.pdf

1、研究背景：
　　Notch作為動(dòng)物體內(nèi)重要的信號分子,在Th細(xì)胞選擇分化成Th1細(xì)胞或Th2細(xì)胞中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,其表達(dá)與Th1炎癥和Th2炎癥的轉(zhuǎn)化密切相關(guān)。Th1炎癥極化,肺組織表現(xiàn)為損傷和破壞,出現(xiàn)肺氣腫樣病理表型;而Th2炎癥極化,肺組織表現(xiàn)為異常修復(fù),出現(xiàn)纖維化樣病理表型。肺氣腫具有Th1型炎癥特點(diǎn),肺纖維化具有Th2型炎癥特點(diǎn),已在我們的前期工作得到驗(yàn)證。Notch及其Delta樣配體上調(diào)傾向于形成Th1型炎癥極化;而N

2、otch與其Jagged配體上調(diào)則更傾向于形成Th2型炎癥極化。本研究通過對比Notch受體及其配體在肺氣腫和肺纖維化炎癥反應(yīng)中的表達(dá)模式,探索Notch信號在肺損傷和修復(fù)中的調(diào)節(jié)機(jī)制。 方法：
　　實(shí)驗(yàn)選用C57BL/6小鼠,采用暴露于香煙煙霧24周和經(jīng)腹腔少量多次注射博來霉素(BLM)的方法分別誘導(dǎo)肺氣腫和肺纖維化模型;收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),了解肺內(nèi)炎癥細(xì)胞的增殖情況;取小鼠氣管旁淋巴結(jié)進(jìn)行實(shí)時(shí)

3、定量PCR及免疫組織化學(xué)技術(shù),檢測肺氣腫和肺纖維化小鼠淋巴結(jié)及周圍淋巴組織的Notch受體及配體的表達(dá)異同。
　　結(jié)果：
　　煙霧暴露組小鼠肺組織出現(xiàn)肺泡間隔變薄等肺氣腫樣病理改變,肺組織平均線性截距較對照組增加了22％(p<0.001),肺泡內(nèi)表面積減少了16%(p<0.05)。BLM組小鼠肺組織出現(xiàn)肺泡間隔增厚等肺纖維化樣病理改變,肺纖維化評分較對照組明顯升高(6.63±0.37vs.2.03±0.15,p<0.001)

4、。煙霧暴露組和BLM組小鼠BALF細(xì)胞總數(shù)較對照組均有明顯升高,煙霧暴露組小鼠中性粒細(xì)胞明顯升高(20.30±0.94vs.4.10±0.46,p<0.001),而BLM組小鼠淋巴細(xì)胞升高則更為顯著(21.25±0.68vs.2.13±0.17,p<0.001)。煙霧暴露組小鼠的氣管旁淋巴結(jié)表達(dá)Notch3(7.29±0.98vs.2.23±0.06,p=0.007)和Dll1(2.85±0.31vs.0.82±0.06,p=0.003

5、)較對照組明顯升高,免疫組化染色顯著增強(qiáng),而BLM組小鼠氣管旁淋巴結(jié)的Notch3(0.54±0.08vs.2.23±0.06,p<0.0001)和Dll1(0.36±0.02vs.0.82±0.06,p=0.002)表達(dá)較對照組顯著降低。
　　結(jié)論：
　　吸煙肺氣腫和BLM肺纖維化存在不同的Notch受體及配體的表達(dá)模式,前者Notch3和Dll1表達(dá)的明顯升高,提示存在Th1炎癥極化,而肺纖維化則相反,Notch3和Dl