骨髓細胞移植治療小鼠急性肝損傷的實驗研究.pdf

1、目的： 觀察骨髓細胞移植對急性肝損傷小鼠肝臟的保護作用，以及移植的骨髓細胞在小鼠肝臟內(nèi)的轉(zhuǎn)歸。 方法： 建立小鼠CCL4急性肝損傷模型，24小時內(nèi)移植入同種異體小鼠全骨髓細胞，然后檢測移植后不同時間肝臟血清轉(zhuǎn)氨酶以及肝臟壞死面積的變化情況；采用免疫熒光雙標方法檢測肝臟中的骨髓來源肝細胞；采用二步法灌注肝臟，消化分離出骨髓移植后2個月受體小鼠的肝臟細胞進行體外培養(yǎng)，進一步鑒定同時了解其生長發(fā)育情況及細胞特性。

2、 結(jié)果： (1)急性肝損傷小鼠接受全骨髓細胞移植后96小時、7天和10天，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT指標較對照組有明顯降低；移植后72小時、96小時、7天和lO天，血清谷草轉(zhuǎn)氨酶AST指標較對照組有明顯降低；移植后72小時和96小時肝臟壞死面積較對照組有明顯下降。 (2)急性肝損傷小鼠接受全骨髓移植后8周的觀察期內(nèi)： ①肝臟中始終存在移植骨髓來源的造血干細胞； ②骨髓移植1周后肝臟中開始出現(xiàn)移植骨髓來源的表達

3、AFP的未成熟肝細胞； ③骨髓移植4周后開始檢測到移植骨髓來源表達ALB的成熟肝細胞，而且此類肝細胞不表達造血干細胞標記CD34。 (3)使用2-乙酰氨基芴能顯著提高移植骨髓來源未成熟肝細胞的數(shù)量，但是不能增加移植骨髓來源成熟肝細胞的數(shù)量。 (4)分離出的肝細胞中有部分是來源于移植骨髓的綠色熒光細胞，這些細胞培養(yǎng)24小時貼壁后直徑平均為24.9±9.2um，能表達AFP，但不表達ALB、Desmin、CD16、C