冠心病患者EPC的變化及LPS和羅格列酮干預(yù)EPC后纖溶和炎癥因子變化的研究.pdf

1、目的：研究從正常健康人外周血中提取單個(gè)核細(xì)胞，用生長(zhǎng)因子VEGF165和bFGF誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮祖細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞的鑒定并分析細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量、成集落數(shù)量和活性。 方法：選擇正常健康人20例，用密度梯度離心法從外周血獲取單個(gè)核細(xì)胞，將其接種在人纖維連接蛋白包被的培養(yǎng)板，用加入生長(zhǎng)因子VEGF165和bFGF及小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞，7d后對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞分析。熒光顯微鏡鑒定FTTC-UEA-I和DiI-acLDL

2、，雙染色陽(yáng)性細(xì)胞為正在分化的EPC；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面抗原CD34+和KDR；用RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞表面的KDR、CD31、VE-Cadherin和vWF的mRNA表達(dá)，采用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)；并分析細(xì)胞形態(tài)和成集落的數(shù)量。 結(jié)果： 1.從外周血中利用密度離心法分離出來(lái)的單個(gè)核細(xì)胞在生長(zhǎng)因子VEGF165和bFGF的誘導(dǎo)分化下，能分化為內(nèi)皮祖細(xì)胞； 2.利用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡及RT-PCR