RIP3介導(dǎo)細(xì)胞程序性壞死下游效應(yīng)蛋白的鑒定.pdf

1、廈門(mén)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫(xiě)作中參考其它個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門(mén)大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為((組)的研究成果，獲得(轱衣2島韓馭i島)課題)課題(組)經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在(轉(zhuǎn)昧1降)實(shí)驗(yàn)室完成。(請(qǐng)?jiān)谝陨侠ㄌ?hào)內(nèi)填寫(xiě)課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱(chēng)，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲

2、明人(簽名)：私棲≯口年o6月口多日摘要細(xì)胞死亡根據(jù)形態(tài)學(xué)上的不同可分為細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死。細(xì)胞壞死是～類(lèi)由化學(xué)因素、物理因素或生物因素等環(huán)境因素傷害引起的細(xì)胞死亡現(xiàn)象，屬于被動(dòng)性死亡。壞死細(xì)胞的形態(tài)改變主要是由蛋白酶降解和蛋白變性?xún)煞N過(guò)程引起的。越來(lái)越多的研究表明，細(xì)胞壞死是一種被機(jī)體細(xì)胞某些內(nèi)在機(jī)制所調(diào)控的、有規(guī)律的細(xì)胞死亡形式。R口3作為受體相互作用蛋白家族(Receptorintera硝ngI玳鈀iIlR口s)重要的一員，是具有

3、特異的絲氨酸(涮he)／蘇氨酸(n鹋onille)激酶活性的蛋白。研究表明，IUP3是n師誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死相互轉(zhuǎn)換的分子開(kāi)關(guān)，砒P3是n旺誘導(dǎo)多種細(xì)胞(如L929細(xì)胞、N細(xì)胞、MEF細(xì)胞)的壞死所必需的。同時(shí)它也是之W山引發(fā)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞壞死所必需。因此，IⅢ，3在誘導(dǎo)細(xì)胞死亡方面有著重要的作用。但是，作為一個(gè)磷酸激酶，哪些蛋白會(huì)被磷酸化，在介導(dǎo)細(xì)胞死亡過(guò)程中R口3與哪些蛋白相互作用，RJP3介導(dǎo)細(xì)胞死亡的分子機(jī)制等科學(xué)問(wèn)題

4、亟待解決。在前期工作中，我們用n嚇?lè)謩e處理野生型的L929細(xì)胞和R皿3基因沉默的L929細(xì)胞收集樣品并進(jìn)行質(zhì)譜分析。通過(guò)全蛋白組分析，我們篩選出一些在野生型L929細(xì)胞中磷酸化水平上升，而在ⅪP3基因沉默的L929細(xì)胞中沒(méi)有明顯上升的蛋白。在本論文中，根據(jù)質(zhì)譜分析的結(jié)果以及相關(guān)文獻(xiàn)的報(bào)道，我們篩選出18個(gè)候選基因。利用lmA干擾技術(shù)，在L929細(xì)胞中基因沉默候選基因并通過(guò)流式細(xì)胞儀分析其對(duì)L929細(xì)胞存活率的影響。實(shí)驗(yàn)表明7個(gè)基因的sh