黑提果渣中花色苷的提取、純化及微膠囊化研究.pdf

1、黑提(Black grape)果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，含有多種維生素和人體必需氨基酸，黑提果渣中的色素是一種可食用的天然色素，屬花色苷類物質(zhì)，具有很好的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。本課題以黑提果渣為原材料，在總結(jié)前人結(jié)論的基礎(chǔ)上，對(duì)花色苷進(jìn)行提取、純化、結(jié)構(gòu)鑒定，并通過(guò)噴霧干燥方法制備黑提花色苷微膠囊，進(jìn)一步提高其穩(wěn)定性。
　　本論文主要分為以下四部分:
　　(1)優(yōu)化了黑提果渣中花色苷的定量分析法。為了防止磷酸對(duì)質(zhì)譜分析儀的損壞，本實(shí)驗(yàn)選用

2、甲酸溶液作為流動(dòng)相，通過(guò)優(yōu)化流動(dòng)相梯度、流速、進(jìn)樣量、柱溫等因素，進(jìn)而得出花色苷的高效液相色譜最佳分離條件為:流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為1％甲酸、15％乙腈;洗脫的梯度:0min(100％B)、12min(88％B)、20min(78％B)、25min(70％B)、30min(stop);進(jìn)樣量為10μL;流速為1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為520nm;柱溫為45℃。最佳分離條件下，花色苷單體得到較好分離，在此基礎(chǔ)上，用標(biāo)準(zhǔn)品（氯化矢車菊

3、素-3-O-葡萄糖苷）建立標(biāo)曲，進(jìn)行定量分析。比較HPLC法和紫外pH示差法對(duì)花色苷含量的測(cè)定結(jié)果，結(jié)果表明，HPLC法測(cè)定結(jié)果是紫外pH示差法的1.31倍。
　　(2)通過(guò)單因素（提取時(shí)間、提取功率、料液比和乙醇濃度）和響應(yīng)面試驗(yàn)，優(yōu)化了微波輔助提取和超聲-微波協(xié)同提取兩種提取工藝，得到微波輔助提取的最佳提取條件為:提取時(shí)間6min，微波功率500w，料液比1∶30，乙醇濃度60％，在此提取條件下，花色苷含量為208.13mg/

4、100g。超聲-微波協(xié)同提取的最佳提取條件為:提取時(shí)間3min，微波功率400w，料液比1∶30，乙醇濃度80％，在此提取條件下，花色苷含量為244.92mg/100g。比較兩種提取方法，可得超聲-微波協(xié)同提取法不僅具有較高提取率，且具有提取時(shí)間較短，功率較低，提取效果較好的優(yōu)點(diǎn)，因此，超聲-微波協(xié)同提取法具有更廣闊的應(yīng)用前景。
　　(3)黑提果渣中含有大量雜質(zhì)，采用大孔樹(shù)脂對(duì)其進(jìn)行純化。首先通過(guò)實(shí)驗(yàn)篩選出最佳大孔樹(shù)脂，分別對(duì)靜態(tài)

5、吸附平衡時(shí)間、靜態(tài)上樣液濃度、靜態(tài)上樣液pH、靜態(tài)解吸醇濃度、動(dòng)態(tài)吸附流速、動(dòng)態(tài)解吸流速等因素進(jìn)行考察，得出最佳純化條件為:選用X-5大孔樹(shù)脂、靜態(tài)吸附平衡時(shí)間1h、靜態(tài)上樣液濃度84mg/L、靜態(tài)上樣液pH=2、靜態(tài)解吸醇濃度70％、動(dòng)態(tài)吸附流速2mL/min、動(dòng)態(tài)解吸流速1mL/min。純化后的花色苷色價(jià)為59.8，是純化前的16.2倍，純化后的純度為14.7％，樹(shù)脂純化后的回收率為74.3％。采用HPLC-ESI-MS/MS方法對(duì)

6、花色苷樣品進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，鑒定出11種花色苷單體成分。其中，以飛燕草素和錦葵色素為母核的花色苷為主要花色苷，分別占總花色苷的36.9％和34.6％。
　　(4)采用噴霧干燥法將花色苷制備成微膠囊形式，從而提高黑提果渣中花色苷的穩(wěn)定性。以微膠囊化效率、含水量、損失率、色價(jià)為主要評(píng)價(jià)指標(biāo)，首先篩選出合適的壁材，再研究芯壁比、進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度等因素對(duì)微膠囊包埋效果的影響，從而得出噴霧干燥的最佳條件為:壁材為麥芽糖糊精，芯壁比(v∶w)5