一例低纖維蛋白原血癥家系基因缺陷的研究.pdf

1、目的:遺傳性低纖維蛋白原血癥(hereditary hypofibrinogenemia)是纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)g)明顯減少的一種遺傳性疾病，由編碼纖維蛋白原的基因(FGA、FGB、FGG)的雜合突變導(dǎo)致，突變類(lèi)型包括錯(cuò)義、無(wú)義、剪切位點(diǎn)、啟動(dòng)子、小的插入和缺失。這些突變可以影響轉(zhuǎn)錄，mR.NA(messenger RNA)的加工，翻譯，翻譯后加工，肽的折疊，鏈的組裝，肝細(xì)胞的分泌，成熟蛋白的穩(wěn)定性。遺傳性低纖維蛋白原血

2、癥是一種罕見(jiàn)的疾病，常發(fā)生于歐洲地區(qū)。目前已發(fā)現(xiàn)的、導(dǎo)致中國(guó)人遺傳性低纖維蛋白原血癥的基因突變屈指可數(shù)，如AαⅣS2+1G＞C、γAsp320Gly、γAsp316His、BβGly419Val和γThr277Arg。我們發(fā)現(xiàn)了1例低纖維蛋白原血癥中國(guó)家系，其原因未明。故本文目的是研究此例低纖維蛋白原血癥家系的基因缺陷，進(jìn)一步揭示遺傳性低纖維蛋白原血癥的發(fā)生機(jī)制。
　　 方法:采集家系外周血，檢測(cè)活化部分凝血活酶時(shí)間(activ

3、eated partial thromboplastin time，APTT)、凝血酶時(shí)間(thrombin time，TT)、凝血酶原時(shí)間(prothrombin time，PT)、D-二聚體(D-dimer)、纖維蛋白降解產(chǎn)物(fibrin degradation products，F(xiàn)DP)、抗凝血酶Ⅲ，F(xiàn)g活性用凝固法進(jìn)行檢測(cè)。抽提外周血基因組DNA，通過(guò)設(shè)計(jì)引物，PCR法擴(kuò)增Fg3個(gè)基因FGA、FGB和FGG所有外顯子，PCR產(chǎn)

4、物純化，DNA直接測(cè)序法進(jìn)行測(cè)序以尋找突變基因。
　　 結(jié)果:先證者及其妹妹、1個(gè)哥哥的Fg水平均明顯減低，分別為0.84g/L，0.87g/L，0.61g/L。先證者及其妹妹有PT、TT延長(zhǎng)，PT分別是15.8sec，15.5sec（正常范圍11-14.5sec），TT分別是30sec，29.7sec（正常范圍14-21sec），D-二聚體、FDP、抗凝血酶Ⅲ為正常范圍。先證者的女兒、兒子及其外甥女Fg水平正常。先證者基因分析

5、顯示在先證者的FGA、FGB、FGG基因區(qū)發(fā)現(xiàn)3個(gè)純合突變:FGAg.1674A＞T;FGAg.3271C＞T;FGGg.4931A＞T，而在家系的其它患者及正常個(gè)體中也發(fā)現(xiàn)此種突變。另外又發(fā)現(xiàn)了3個(gè)雜合突變:FGGg.7925C＞T;FGGg.8208G＞A;FGGg.7933G＞A。
　　 結(jié)論:在家系的其他患者和正常個(gè)體中都發(fā)現(xiàn)了這3個(gè)純合突變，故純合突變不是致病突變。而發(fā)現(xiàn)的3個(gè)雜合突變可能為致病突變，有待進(jìn)一步的全基因