金納米棒介導(dǎo)的靶向沉默吲哚胺2,3-雙加氧酶1聯(lián)合光熱效應(yīng)對(duì)Lewis肺癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、1分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：406531415763南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文金納米棒介導(dǎo)的靶向沉默金納米棒介導(dǎo)的靶向沉默吲哚胺吲哚胺23雙加氧酶雙加氧酶1聯(lián)合光熱效應(yīng)聯(lián)合光熱效應(yīng)對(duì)Lewis肺癌的肺癌的實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)研究研究Anovelanticancertherapyusinggoldnanodsmediatedtargetededgenesilencingindolamine23dioxygenasecombinedwithphoto

2、thermaleffectonLewislungcancer馮媛媛馮媛媛培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)部指導(dǎo)教師姓名、職稱：袁鏗研究員閔衛(wèi)平教授申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：免疫學(xué)論文答辯日期：2018年5月答辯委員會(huì)主席：謝勇評(píng)閱人：盲審盲審2018年5月摘要II摘要目的目的：IDO1是一種重要的免疫負(fù)調(diào)控分子，在調(diào)控腫瘤的免疫逃逸中發(fā)揮非常重要的作用，它通過(guò)改變腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移的能力，從而影響腫瘤的臨床治療的效果。本研

3、究以小鼠肺癌為模型構(gòu)建靶向小鼠肺癌的納米基因?qū)胂到y(tǒng)GNRMUAPEIFA（GMPF）siIDO1，探討其對(duì)小鼠肺癌(Lewislungcancer)的腫瘤靶向性、IDO1基因的沉默效果、評(píng)估該納米靶向系統(tǒng)聯(lián)合光熱效應(yīng)對(duì)小鼠肺癌的治療作用及其機(jī)制。方法方法：1.GNRMUAPEIFA納米材料的構(gòu)建；參考經(jīng)典的晶種子溶液生長(zhǎng)法合成本實(shí)驗(yàn)所需的金納米棒，并對(duì)金納米棒進(jìn)行進(jìn)一步的功能化修飾。通過(guò)透射電子顯微鏡檢測(cè)金納米棒修飾前后的大小以及分散

4、度情況；通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)紫外吸收光譜，觀察其表面等離子共振效應(yīng)；并通過(guò)核磁共振氫譜分析檢測(cè)修飾前后金納米棒表面的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。2.MTT法檢測(cè)金納米棒功能化修飾前后對(duì)細(xì)胞的毒性。3.凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GMPF與siIDO1結(jié)合的最佳質(zhì)量比例、GMPFsiIDO1結(jié)合后siRNA的釋放能力以及GMPFsiIDO1在血清中的穩(wěn)定性。4.流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)GMPFcy3siGAPDH對(duì)LLC的轉(zhuǎn)染效率，確定其最佳轉(zhuǎn)染濃度和對(duì)LLC肺癌細(xì)胞的靶向性。5

5、.qPCR、WB檢測(cè)GMPFsiIDO1對(duì)LLC細(xì)胞的IDO1的沉默效果。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)體外GMPFsiIDO1基因沉默聯(lián)合光熱效應(yīng)對(duì)LLC細(xì)胞凋亡的影響。6.將GMPFcy3siGAPDH通過(guò)尾靜脈注射至C57BL6小鼠體內(nèi)，24h后取其心肝脾肺腎和腫瘤組織制成冰凍切片，熒光顯微鏡觀察GMPFcy3siGAPDH靶向作用。7.將GMPFsiIDO1通過(guò)尾靜脈注射至C57BL6小鼠體內(nèi)，通過(guò)基因沉默IDO1聯(lián)合GMPF光熱效應(yīng)協(xié)同治療小