版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉是目前我國(guó)種植面積最大的轉(zhuǎn)基因作物。美國(guó)孟山都公司研發(fā)的一代抗蟲(chóng)棉MON531轉(zhuǎn)化體已在我國(guó)批準(zhǔn)商業(yè)化種植和應(yīng)用超過(guò)20年。MON531R7569是本實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)的與MON531轉(zhuǎn)化體具有相同旁側(cè)序列但cry1Ac基因發(fā)生截短的轉(zhuǎn)基因棉花材料。本研究驗(yàn)證了MON531R7569的分子結(jié)構(gòu),建立了其檢測(cè)方法,分析了截短cry1Ac基因的轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平,初步分析了cry1Ac基因的甲基化情況,主要結(jié)果有以下五個(gè)方面.
2、 1.采用PCR方法驗(yàn)證了MON531R7569的外源整合結(jié)構(gòu),并建立了MON531R7569的特異性定量PCR檢測(cè)方法。結(jié)果表明:MON531R7569的轉(zhuǎn)基因整合結(jié)構(gòu)與MON531整合結(jié)構(gòu)相同,但cry1Ac基因3'端序列及終止子區(qū)域發(fā)生缺失?;赾ry1Ac基因重組區(qū)域建立了定量檢測(cè)方法,對(duì)476份市場(chǎng)轉(zhuǎn)基因棉花的定量分析表明有4份樣品檢出MON531R7569,含量最高為1.56%。
2.利用RACE和RT-PCR方法
3、分析了MON531R7569的cry1Ac基因轉(zhuǎn)錄本和轉(zhuǎn)錄水平。轉(zhuǎn)錄本分析表明MON531R7569的cry1Ac基因轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)主要集中在截短位置下游161-173和233-265堿基處。轉(zhuǎn)錄水平分析表明MON531R7569和MON531的葉片中cry1Ac基因的轉(zhuǎn)錄水平隨苗期、蕾期、鈴期逐漸下降,MON531R7569苗期和蕾期葉片中的cry1Ac基因轉(zhuǎn)錄水平均顯著高于MON531,但鈴期葉片中無(wú)顯著差異。
3.采用EL
4、ISA方法測(cè)定了MON531R7569中Cry1Ac蛋白表達(dá)量。結(jié)果表明葉片中Cry1Ac蛋白表達(dá)量隨苗期、蕾期、鈴期逐漸下降,三個(gè)時(shí)期的Cry1Ac蛋白表達(dá)量均高于MON531。
4.采用離體葉片法測(cè)定了對(duì)MON531R7569苗期葉片對(duì)棉鈴蟲(chóng)的抗性。結(jié)果表明MON531R7569轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的校正死亡率為99.47%,轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉MON531R7569的抗性水平為高抗;MON531轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉對(duì)棉鈴蟲(chóng)的校正死亡
5、率為95.21%,轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉MON531的抗性水平為高抗。
5.采用甲基化敏感內(nèi)切酶定量PCR方法(MSRE-qPCR)和亞硫酸鹽測(cè)序法(BS-seq),分析了MON531R7569和MON531中cry1Ac基因表達(dá)框序列的甲基化水平。結(jié)果顯示全部13個(gè)HpyCH4IV位點(diǎn)中MON531R7569有3個(gè)位點(diǎn)甲基化水平高,位于截短cry1Ac基因閱讀框之外。而MON531有5個(gè)位點(diǎn)甲基化水平高,位于cry1Ac基因的3'端區(qū)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 轉(zhuǎn)化體疊加的轉(zhuǎn)基因棉花cry1Ac基因表達(dá)及啟動(dòng)子甲基化分析.pdf
- 人工改造的cry1Ac、cry1Ie基因在大腸桿菌、轉(zhuǎn)基因煙草和玉米中的表達(dá).pdf
- 30937.新殺蟲(chóng)基因cry1ac22的克隆、表達(dá)及其轉(zhuǎn)基因研究
- 抗Cry1Ac近等基因系小菜蛾類鈣粘蛋白基因片段表達(dá)及增效作用研究.pdf
- 利用Cry1Ac和CpTI雙價(jià)基因及組織特異啟動(dòng)子增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)螟蟲(chóng)的抗性.pdf
- Zwittermicin A對(duì)Cry1Ac殺蟲(chóng)作用增效機(jī)理的初步研究.pdf
- 棉鈴蟲(chóng)田間種群Cry1Ac抗性等位基因頻率檢測(cè)及LF8品系Cry1Ac抗性的遺傳定位.pdf
- 52965.蘇云金桿菌伴孢晶體20kbdna中cry1ac基因的高效表達(dá)和生物活性研究
- Cry1Ac蛋白ELISA檢測(cè)體系的建立.pdf
- 蘇云金芽孢桿菌晶體殺蟲(chóng)蛋白Cry1Ac基因在蟲(chóng)生真菌球孢白僵菌中的表達(dá).pdf
- 蘇云金芽胞桿菌cry1Ac基因與球孢白僵菌CDEP2基因的融合表達(dá)及功能研究.pdf
- 蘇云金芽孢桿菌分離株基因類型的PCR檢測(cè)、RFLP分析及特異菌株cry1Ac全基因克隆.pdf
- Tat-Cry1Ac結(jié)構(gòu)域基因表達(dá)載體構(gòu)建.pdf
- 棉花GhHB基因克隆和表達(dá)初步分析.pdf
- 攜帶Cry1Ac-CPTi基因野生稻的適合度及外源基因遺傳表達(dá)分析.pdf
- 棉鈴蟲(chóng)田間種群Cry1Ac抗性基因頻率的估算及鈣粘蛋白基因突變的鑒定.pdf
- 棉花GhADF基因克隆和表達(dá)初步分析.pdf
- 棉花MADS和BZR基因鑒定及轉(zhuǎn)基因棉花表型分析.pdf
- 棉花GhMYBL基因克隆和初步表達(dá)分析.pdf
- Bt Cry1Ac毒素在二點(diǎn)委夜蛾中腸受體蛋白APN基因克隆及功能分析.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論