老龍皮的藥效物質(zhì)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、目的：通過對老龍皮LobariakurokauaeYoshim.的藥效活性部位和化學(xué)成分的試驗(yàn)研究，尋找老龍皮的質(zhì)控指標(biāo)并制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為綜合評價(jià)老龍皮的質(zhì)量及其合理開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：將老龍皮藥材分別用水和乙醇提取進(jìn)行藥理學(xué)研究，藥效學(xué)試驗(yàn)采用二甲苯致小鼠耳腫脹模型和棉球肉芽腫模型對兩個部位進(jìn)行抗炎活性篩選、采用試管二倍稀釋法和紙片法對兩個部位進(jìn)行體外抑菌活性篩選、采用DPPH清除試驗(yàn)和還原Fe3+能力測試法

2、進(jìn)行體外抗氧化活性篩選，并對其進(jìn)行進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)研究。
　　 在藥效活性篩選試驗(yàn)基礎(chǔ)上，確定老龍皮乙醇提取物為主要有效部位。采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次對老龍皮80％乙醇提取物進(jìn)行萃取，硅膠柱層析法對各萃取部位進(jìn)行化學(xué)成分分離純化研究。
　　 以《中國藥典》(2010年版一部)為主要依據(jù)，采用生藥學(xué)鑒定和薄層色譜法對老龍皮進(jìn)行鑒別項(xiàng)研究；采用水分測定法、灰分測定法、原子吸收分光光度法法進(jìn)行檢查項(xiàng)研究；采用乙醇熱浸法

3、進(jìn)行浸出物含量研究；采用高效液相色譜法對老龍皮中主要成分進(jìn)行網(wǎng)脊衣酸A含量測定方法研究。
　　 結(jié)果：與陰性對照組比較，老龍皮乙醇提取物高劑量組(40g生藥/kg)對二甲苯致小鼠耳腫脹有抑制作用(P<0.05)，抑制率為45.38％，老龍皮乙醇提取物低劑量組(10g生藥/kg)對棉球誘發(fā)小鼠肉芽組織增生有顯著抑制作用(P<0.01)，抑制率為26.28％。體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明老龍皮乙醇提取物和水提取物均有一定的抑菌作用，敏感菌為

4、大腸桿菌和白色念珠球菌，乙醇提取物作用較水提取物強(qiáng)，二者的殺菌能力均較弱。體外抗氧化試驗(yàn)結(jié)果表明老龍皮乙醇提取物對DPPH的清除率和對Fe3+的還原能力均優(yōu)于老龍皮水提取物。老龍皮水提取物的小鼠最大耐受量為148g生藥/kg，相當(dāng)于人一日用量的592倍，老龍皮乙醇提取物的小鼠最大耐受量為196g生藥/kg，相當(dāng)于人一日用量的784倍。
　　 硅膠柱層析法分離純化得到7個化合物，綜合運(yùn)用1H-NMR、13C-NMR和MS等鑒定其結(jié)

5、構(gòu)為：十六烷酸(palmitinicacid)、Stictan-3β，22α-diol、齊墩果酸(oleanolicacid)、熊果酸(ursolicacid)、金色酰胺醇酯(aurantiamideacetate)、網(wǎng)脊衣酸A(retigericacidA)、網(wǎng)脊衣酸B(retigericacidB)。其中齊墩果酸、熊果酸和金色酰胺醇酯為首次從老龍皮中分得。
　　 確定以網(wǎng)脊衣酸A和網(wǎng)脊衣酸B對照品為對照、甲苯-乙酸乙酯-甲酸

6、為展開劑的薄層色譜鑒別；確定檢查項(xiàng)下水分不得過12.0％、總灰分不得過14.0％、酸不溶性灰分不得過8.0％、鉛不得過百萬分之二十五、鎘不得過千萬分之三、銅不得過百萬分之十二、砷不得過百萬分之二、汞不得過千萬分之六；確定80％乙醇熱浸法浸出物不得低于6.0％；確定老龍皮中網(wǎng)脊衣酸A的含量不得低于0.43％。
　　 結(jié)論：老龍皮有抗炎、體外抑菌和體外抗氧化作用，其主要活性部位為乙醇提取部位。通過研究對其化學(xué)成分有了進(jìn)一步的了解，初