整合素αIIbβ3介導的信號通路負反饋抑制血小板激活.pdf

1、整合素αⅡbβ3介導的“outside-in(outside-in)”的信號轉導被廣泛的認為是擴大血小板激活反應的，然而越來越多的證據(jù)表明“outside-in”的信號轉導在某些情況下可以抑制血小板的激活。為了弄明白整合素αⅡbβ3介導的“outside-in”信號通路對血小板激活的確切作用，我們通過血小板聚集儀，流式細胞儀，免疫印跡及免疫共沉淀等方法發(fā)現(xiàn)(1)整合素αⅡbβ3的抑制劑RUC2和RGD-peptide對低劑量CRP和TR

2、AP引起的血小板ATP釋放起促進作用。說明整合素αⅡbβ3介導的“outside-in”信號通路抑制血小板ATP釋放。因為血小板釋放對血小板聚集起擴大作用，所以整合素αⅡbβ3介導的“outside-in”信號通路具有負調控血小板聚集的作用。(2)在ADP為刺激劑的情況下，血小板聚集時Talin和Kindlin-3結合到整合素β3亞基上，當血小板解聚時，Talin和Kindlin-3從整合素β3上脫落下來。加入RGD-peptide抑制

3、Talin和Kindlin-3從整合素αⅡbβ3上脫落。說明是整合素αⅡbβ3介導的“outside-in”信號通路參與調節(jié)Talin和Kindlin-3從整合素β3上脫落。(3)當刺激劑誘導整合素αⅡbβ3激活時，Akt發(fā)生磷酸化;而激活的整合素和配體纖維蛋白原結合，血小板發(fā)生聚集后，Akt發(fā)生去磷酸化，PI3K信號通路失活。加入整合素抑制劑RGD-peptide后，Akt的去磷酸化作用被抑制。說明Akt失活是由整合素αⅡbβ3“ou

4、tside-in”信號通路介導的。(4)我們加入SHIP-1抑制劑3AC后，Akt去磷酸化作用被抑制。說明SHIP-1參與調節(jié)Akt的去磷酸化作用。(5)SHIP-1的抑制劑3AC抑制血小板解聚，同時恢復ADP誘導的血小板ATP釋放，而且能消除整合素介導的從外到內信號通路對血小板ATP釋放的抑制效應。說明整合素介導的從外到內的信號通路通過激活SHIP-1，進而抑制血小板ATP的釋放，所以SHIP-1是血小板聚集的負調控蛋白。這些結果暗示