蜜環(huán)菌菌索多糖降血糖作用機(jī)理的研究.pdf

1、本試驗(yàn)對(duì)蜜環(huán)菌菌索多糖進(jìn)行了提取、分離和純化，得到了兩種多糖成分，分別為水相多糖（AMP-1）和鹽相多糖（AMP-2）。以AMP-1為材料，對(duì)其降血糖作用機(jī)理進(jìn)行深入的研究。研究的結(jié)果和結(jié)論如下：
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖的提取、分離與純化：
　　 靜置培養(yǎng)蜜環(huán)菌一段時(shí)間，取其菌索打粹，進(jìn)行水提、醇沉、濃縮合并上清，透析后經(jīng)DEAE-纖維素柱色譜（cl-1型）分離，得到了兩種多糖成分AMP-1和AMP-2。測(cè)得AMP-1為均

2、一組分，AMP-2至少包含有兩種組分。
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖體內(nèi)降血糖與清除自由基作用：
　　 復(fù)制四氧嘧啶糖尿病小鼠模型。研究AMP-1對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖值、胰島素值和胰腺、肝臟、脾臟、腎臟組織中的SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量及其干重、體重的影響。結(jié)果表明，AMP-1能顯著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖值，增加血清胰島素水平；能顯著提高小鼠體內(nèi)SOD、GSH-Px活性并降低MDA含量，且呈劑量依賴關(guān)系

3、；能抑制AXN造成的小鼠體重的減輕與肝臟、腎臟、胰腺的萎縮和脾臟的增大。
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖對(duì)AXN損傷的胰島細(xì)胞的影響：
　　 培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細(xì)胞(INS-1)，以AXN損傷，培養(yǎng)液中加入不同濃度的AMP-1（50、100、200、300、400、500mg·L-1），MTT法測(cè)細(xì)胞存活率；PI熒光染色法觀測(cè)凋亡細(xì)胞密度；流式細(xì)胞術(shù)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率；結(jié)果如下：AMP-1可減少AXN對(duì)INS-1細(xì)胞的損傷，增加INS

4、-1細(xì)胞的存活率；AMP-1濃度在50mg·L-1至500mg·L-1之間均可提高受AXN損傷的INS-1細(xì)胞的存活率，其中濃度為400mg·L-1時(shí)存活率最高；凋亡細(xì)胞密度，隨AMP-1濃度的增大而降低；AMP-1組INS-1細(xì)胞凋亡率均低于AXN組。
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖體外抗凋亡通路的研究：
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖對(duì)AXN損傷的胰島細(xì)胞的抗凋亡作用：培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細(xì)胞(INS-1)，以AXN損傷細(xì)胞，培養(yǎng)液中加入不

5、同濃度的AMP-1（50、100、200、300、400、500mg·L-1），通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率以及用western blot法檢測(cè)蛋白bcl-2和bax的表達(dá)來(lái)研究AMP-1對(duì)AXN損傷的INS-1細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果如下：在AMP-1處理組中，當(dāng)其濃度在50～ 500mg·L-1范圍時(shí)，AMP-1對(duì)AXN引起的INS-1細(xì)胞的凋亡現(xiàn)象有著顯著的抑制作用。
　　 通過(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明，AMP-1有提高抗氧化酶活力，增