蜜環(huán)菌菌索多糖降血糖作用機理的研究.pdf

1、本試驗對蜜環(huán)菌菌索多糖進行了提取、分離和純化，得到了兩種多糖成分，分別為水相多糖（AMP-1）和鹽相多糖（AMP-2）。以AMP-1為材料，對其降血糖作用機理進行深入的研究。研究的結果和結論如下：
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖的提取、分離與純化：
　　 靜置培養(yǎng)蜜環(huán)菌一段時間，取其菌索打粹，進行水提、醇沉、濃縮合并上清，透析后經DEAE-纖維素柱色譜（cl-1型）分離，得到了兩種多糖成分AMP-1和AMP-2。測得AMP-1為均

2、一組分，AMP-2至少包含有兩種組分。
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖體內降血糖與清除自由基作用：
　　 復制四氧嘧啶糖尿病小鼠模型。研究AMP-1對四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖值、胰島素值和胰腺、肝臟、脾臟、腎臟組織中的SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量及其干重、體重的影響。結果表明，AMP-1能顯著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖值，增加血清胰島素水平；能顯著提高小鼠體內SOD、GSH-Px活性并降低MDA含量，且呈劑量依賴關系

3、；能抑制AXN造成的小鼠體重的減輕與肝臟、腎臟、胰腺的萎縮和脾臟的增大。
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖對AXN損傷的胰島細胞的影響：
　　 培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細胞(INS-1)，以AXN損傷，培養(yǎng)液中加入不同濃度的AMP-1（50、100、200、300、400、500mg·L-1），MTT法測細胞存活率；PI熒光染色法觀測凋亡細胞密度；流式細胞術法檢測細胞凋亡率；結果如下：AMP-1可減少AXN對INS-1細胞的損傷，增加INS

4、-1細胞的存活率；AMP-1濃度在50mg·L-1至500mg·L-1之間均可提高受AXN損傷的INS-1細胞的存活率，其中濃度為400mg·L-1時存活率最高；凋亡細胞密度，隨AMP-1濃度的增大而降低；AMP-1組INS-1細胞凋亡率均低于AXN組。
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖體外抗凋亡通路的研究：
　　 蜜環(huán)菌菌索多糖對AXN損傷的胰島細胞的抗凋亡作用：培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細胞(INS-1)，以AXN損傷細胞，培養(yǎng)液中加入不

5、同濃度的AMP-1（50、100、200、300、400、500mg·L-1），通過流式細胞儀檢測細胞凋亡率以及用western blot法檢測蛋白bcl-2和bax的表達來研究AMP-1對AXN損傷的INS-1細胞凋亡的影響。結果如下：在AMP-1處理組中，當其濃度在50～ 500mg·L-1范圍時，AMP-1對AXN引起的INS-1細胞的凋亡現象有著顯著的抑制作用。
　　 通過體內外實驗表明，AMP-1有提高抗氧化酶活力，增