白背三七多糖及黃酮的提取測(cè)定與降血糖作用研究.pdf

1、本文以岳陽(yáng)植物白背三七干燥植株為原料，對(duì)白背三七多糖的提取、分離、純化、分子量測(cè)定及黃酮的提取測(cè)定、兩者降血糖藥理作用進(jìn)行了研究探討。通過(guò)大量基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)探討，首次建立了白背三七總黃酮（TFGD）和白背三七多糖（PGD）的優(yōu)化提取方案。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明白背三七總黃酮的優(yōu)化提取條件為：乙醇濃度70％，溶劑用量1：12，提取2次，每次1.5 h，在此條件下白背三七總黃酮得率為3.0％。白背三七水溶性多糖最優(yōu)提取工藝為：溫度90℃，提取時(shí)間2.5 h

2、，提取2次，固液比1：9，在此條件下總多糖得率為1.49％。通過(guò)對(duì)脫蛋白、醇沉、脫色效果進(jìn)行考察，優(yōu)化白背三七多糖分離純化方案。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：75％乙醇沉淀多糖得率較高；采用活性炭脫色，溫度80℃、脫色45min、活性炭質(zhì)量分?jǐn)?shù)15％、脫色2次，脫色效果最好；如采用雙氧水脫色，則溫度60℃、脫色120 min、雙氧水加入量為多糖溶液體積的70％，脫色效果最佳。兩種脫色方法各有利弊，仍有深入研究的空間。樣品多糖采用DEAE—52柱層析得P

3、GD-1、PGD—2、PGD—3，PGD—2繼以Sephadex G-100柱層析，得一單峰。本課題首次采用高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法（HPGFC—ELSD）檢測(cè)白背三七多糖的重均分子量。采用T5、T10、T20、T40、T70標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖系列以重均分子量對(duì)數(shù)值對(duì)保留時(shí)間繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)得白背三七多糖重均相對(duì)分子質(zhì)量（Mw）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Mw在5000～70000范圍內(nèi)，方法線性良好，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：1gMw=—0.2805

4、tR+3.2924，r=—0.9804，測(cè)得樣品多糖重均分子量為26242。該法操作簡(jiǎn)便，方法重現(xiàn)性較好，準(zhǔn)確性較高。 本文對(duì)糖尿病小鼠建模條件進(jìn)行了優(yōu)化，采用雄性小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，高脂喂養(yǎng)結(jié)合腹腔注射四氧嘧啶生理鹽水溶液建立糖尿病小鼠模型，方法成模率高，死亡率較低，且較符合Ⅱ型糖尿病患者發(fā)病特征。建模成功后采用連續(xù)灌胃給藥方式考察白背三七多糖和總黃酮提取物的降血糖效果及小鼠耐缺氧能力，研究結(jié)果表明白背三七多糖和黃酮具有較好的降血