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1、目的:
本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用行為學(xué)觀察、時(shí)間生物學(xué)研究方法及分子生物學(xué)技術(shù)等,研究糖尿病抑郁大鼠的血糖-HPA軸-情緒晝夜節(jié)律的改變特點(diǎn),并且探討針刺對(duì)Per1mRNA、Per2mRNA的基因表達(dá)的影響,揭示針刺調(diào)節(jié)糖尿病抑郁的血糖-HPA軸-情緒晝夜節(jié)律紊亂的相關(guān)分子生物機(jī)理。
方法:
將32只雄性SD大鼠,隨機(jī)分為空白組、糖尿病組、糖尿病抑郁組及針刺組,每組8只。空白組給予普通喂養(yǎng);糖尿病組給予高脂喂養(yǎng)及STZ試
2、劑腹腔注射造模;糖尿病抑郁組給予高脂喂養(yǎng)、STZ試劑腹腔注射及慢性應(yīng)激造糖尿病抑郁模型;針刺組在糖尿病抑郁組造模基礎(chǔ)上針刺后三里、三陰交及百會(huì)穴,留針15分鐘,連續(xù)治療7天。針刺治療后,采用股動(dòng)脈取血及斷頸取腦法取出各組大鼠的血清及下丘腦組織,采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定皮質(zhì)醇水平,采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)對(duì)大鼠SCN內(nèi)的的per1mRNA、per2mRNA基因的表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)。
結(jié)果:
1.糖尿病組血糖及情緒:(1)與空白
3、組比較,糖尿病組大鼠的血糖值升高(P<0.05),曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)值下降(P<0.05)。(2)與空白組比較,糖尿病組大鼠的24小時(shí)內(nèi)的血糖谷峰值差異大(P<0.05);且其24小時(shí)內(nèi)的血糖值及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的峰值出現(xiàn)時(shí)間延后。
2.糖尿病抑郁組血糖及情緒:(1)與空白組大鼠及糖尿病組大鼠比較,糖尿病抑郁組大鼠的血糖值升高(P<0.05),曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)值下降(P<0.05)。(2)與空白組比較,糖尿病抑郁組大鼠24小時(shí)內(nèi)血糖的谷峰值
4、差異大(P<0.05),糖尿病抑郁組大鼠24小時(shí)內(nèi)的血糖峰值出現(xiàn)時(shí)間延后,其24小時(shí)內(nèi)的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)值改變趨勢(shì)與空白組大鼠相反。
3.針刺組血糖及情緒:(1)與糖尿病抑郁組比較,針刺組大鼠的血糖值下降(P<0.05),其曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)值上升(P<0.05)。(2)針刺組大鼠的血糖谷峰值差異大(P<0.05),針刺組大鼠血糖值的次高峰與次低谷的出現(xiàn)時(shí)間與空白組相同,其峰谷值出現(xiàn)時(shí)間有向空白組移位的趨勢(shì),且10:00-22:00的最
5、大值與最小值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);針刺組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與空白組均呈現(xiàn)雙峰雙谷的節(jié)律變化。
4.各組的皮質(zhì)醇水平:與空白組比較,糖尿病組大鼠、糖尿病抑郁組大鼠及針刺組大鼠的皮質(zhì)醇水平升高(P<0.05);且三組的皮質(zhì)醇比較:糖尿病抑郁組>糖尿病組>針刺組(P<0.05)。
5.各組的Per1mRNA、Per2mRAN基因表達(dá):與空白組比較,糖尿病組大鼠、糖尿病抑郁組大鼠及針刺組大鼠的Per2mRNA的表達(dá)量升
6、高(P<0.05);與糖尿病抑郁組及糖尿病組大鼠比較,針刺組大鼠的Per2mRNA的表達(dá)量下降;各組大鼠的Per1mRNA的表達(dá)量比較:空白組<針刺組<糖尿病組<糖尿病抑郁組(P>0.05)。
結(jié)論:
1、針刺具有改善糖尿病抑郁大鼠的血糖、抑郁情緒及調(diào)節(jié)其血糖、情緒節(jié)律的作用。
2、針刺具有降低糖尿病抑郁大鼠的皮質(zhì)醇水平的作用。
3、針刺具有調(diào)節(jié)糖尿病抑郁大鼠的Per2mRNA的表達(dá)的作用;針刺可
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