腎小球腎炎中足細胞UCH-L1的表達及其相關因素初步研究.pdf

1、泛素-蛋白酶體途徑是調(diào)控細胞內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的一個重要途徑，它在很多細胞活動，包括細胞周期、信號傳導、受體功能、發(fā)育分化中起調(diào)節(jié)作用。該途徑是一個受多種因素調(diào)控的可逆過程，這其中存在一些特異性的去泛素化蛋白酶的參與。泛素羧基末端水解酶-1(UCH-L1)，又名蛋白基因產(chǎn)物9.5(PGP9.5)，就是去泛素化酶家族中的重要一員。UCH-L1在正常狀態(tài)下的組織分布十分有限，目前的文獻報道僅限于神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和腎臟。相比而言，有關UCH-L1

2、與疾病相關性的研究較多。大量研究表明UCH-L1的改變與神經(jīng)退行性病變的發(fā)病有關，在很多類型的腫瘤細胞中也發(fā)現(xiàn)了UCH-L1的異常高表達。腎臟方面，有文獻報道在人和大鼠的正常及病變腎組織的腎小球壁層上皮細胞和腎小管上皮細胞中檢測到了UCH-L1的表達，在腎癌和腎間質(zhì)腫瘤中也發(fā)現(xiàn)了UCH-L1的過表達，但其在腎小球毛細血管襻內(nèi)是否表達還不清楚。
　　 為明確腎小球內(nèi)是否存在UCH-L1的表達，本實驗首先對臨床收集的98例腎穿標本及

3、腎癌旁正常組織標本進行了UCH-L1的免疫組化檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)UCH-L1不僅表達于腎小管上皮細胞和球囊壁細胞，還表達于腎小球毛細血管襻內(nèi)，且多分布于血管襻邊緣。實驗結(jié)果還發(fā)現(xiàn)小球內(nèi)UCH-L1的表達水平在不同病理類型的腎小球腎炎中存在較大的差異。與癌旁正常組織相比，UCH-L1的表達在輕微病變、微小病變病和局灶節(jié)段性腎小球硬化癥的腎小球中基本沒有改變，而在急性彌漫增生性腎炎、狼瘡性腎炎、膜性腎炎和IgA腎病的小球內(nèi)則明顯升高，其差異有統(tǒng)

4、計學意義(P<0.05)。
　　 石蠟切片上顯示UCH-L1的小球內(nèi)表達近似于足突細胞的分布，為了證實這一猜想，我們對腎穿標本運用免疫熒光雙標和免疫電鏡的方法，發(fā)現(xiàn)UCH-L1明確表達于某些腎小球。腎炎的足細胞胞漿及足突中。
　　 免疫組化的統(tǒng)計結(jié)果表明在某些腎小球腎炎，如急性彌漫增生性腎炎、狼瘡性腎炎中足細胞UCH-L1的表達較癌旁正常組織明顯升高。為了探究足細胞UCH-L1表達升高的可能誘因，實驗選取了一些常見的炎癥

5、相關因子TGF-β1、TNF-α、IL-1以及抗鼠胸腺細胞抗體(可形成致腎炎免疫復合物)和含補體的新鮮人血清，對體外培養(yǎng)的正常大鼠足細胞進行刺激，結(jié)果顯示正常大鼠足細胞中存在基礎水平的UCH-L1表達，細胞因子TGF-β1、TNF-α、IL-1短時間內(nèi)對足細胞的UCH-L1表達沒有明顯影響，而免疫復合物是引起足細胞UCH-L1表達升高的一個主要原因。補體可誘導足細胞UCH-L1早期一過性的表達升高。
　　 研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞，如非

6、小細胞性肺癌細胞、腸癌細胞及腎癌細胞中UCH-L1的異常高表達與癌細胞增生的異常調(diào)控有關；UCH-L1還表達于生殖細胞并調(diào)控著細胞的增殖、凋亡及分化；UCH-L1表達升高的腎小管上皮細胞表現(xiàn)為增生和代謝活躍。這些資料都提示UCH-L1的表達與細胞生長之間存在一定的聯(lián)系。因此我們進一步研究了腎小球腎炎時足細胞中UCH-L1的表達升高與足細胞損傷后再生修復的關系。我們對收集的腎穿標本進行了PCNA的免疫組化檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)存在有明顯免疫復合物

7、沉積的急性彌漫增生性腎炎和狼瘡性腎炎的足細胞中PCNA表達陽性的細胞比例相比于正常組織、微小病變病和局灶節(jié)段性腎小球硬化癥明顯升高，而各類腎小球腎炎的小球內(nèi)足細胞總數(shù)沒有統(tǒng)計學差異。體外實驗進一步證實免疫復合物刺激后大鼠足細胞的PCNA蛋白表達升高，同時P27表達降低。這些數(shù)據(jù)說明免疫復合物所致?lián)p傷誘導了足細胞的再生修復反應，免疫復合物刺激下足細胞UCH-L1的表達升高可能與足細胞的再生修復密切相關，可以作為腎小球腎炎時足細胞損傷的一種

8、標志。
　　 綜上所述，本次實驗發(fā)現(xiàn)在人腎組織中除了已報道的小管上皮和球囊壁上皮有UCH-L1表達外，足細胞也表達UCH-L1，且其表達水平在不同病理類型的腎小球腎炎中存在差異，其中以狼瘡性腎炎和急性彌漫增生性腎炎中的表達升高較為顯著。體外實驗進一步證實免疫復合物是足細胞UCH-L1表達升高的一個主要誘因。足細胞UCH-L1表達升高與足細胞損傷脫失后的再生修復反應可能存在一定的聯(lián)系。本實驗的研究結(jié)果有助于加深對免疫復合物介導的腎