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1、黃曲霉菌污染在糧食和飼料中廣泛存在,被污染的產(chǎn)品不僅喪失了部分營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,而且其產(chǎn)生的黃曲霉毒素會(huì)直接和間接對(duì)人類和動(dòng)物造成毒害作用。植物來源的天然防霉劑具有良好的抑菌防霉效果,還能保持糧食和飼料等產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,同時(shí)不污染環(huán)境,對(duì)人畜安全,可提供一種較好解決黃曲霉菌污染問題的備選方法。
本論文選取馬齒莧全草作為研究對(duì)象,采用超聲破碎提取法確定了其黃酮類化合物的適宜提取條件,利用高效液相色譜法構(gòu)建了馬齒莧黃酮類化合物提取物的批間
2、活性穩(wěn)定性評(píng)價(jià)方法,并利用生物活性導(dǎo)向篩選法確定了可抑制黃曲霉菌生長(zhǎng)的有效餾分。具體研究?jī)?nèi)容和研究結(jié)果包括以下三個(gè)方面:
(1)采用超聲破碎提取法,考察了乙醇濃度、料液比、提取溶劑pH值、超聲時(shí)間、超聲功率、超聲溫度等條件對(duì)馬齒莧全草黃酮類化合物提取量的影響,確定了馬齒莧全草黃酮類化合物的適宜提取條件為:乙醇濃度90%,料液比1/50(g/mL),提取溶劑pH值8.5,超聲功率700w,超聲時(shí)間40min,超聲溫度60℃。在此
3、條件下,馬齒莧全草黃酮類化合物的提取量與原料干重比例最高可達(dá)到3.85mg/g。
(2)采用高效液相色譜法,考察了檢測(cè)波長(zhǎng)、流動(dòng)相、改性劑、柱溫、流速對(duì)馬齒莧全草黃酮類化合物提取物高效液相色譜分離效果的影響,確定了適宜的高效液相色譜分析條件:波長(zhǎng)為325nm、流動(dòng)相為甲醇-水系統(tǒng)、改性劑為乙酸、流速為1mL/min、柱溫為30℃。利用中藥指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件評(píng)估10批馬齒莧全草黃酮類化合物提取物的相似度>0.97。經(jīng)方法
4、學(xué)驗(yàn)證,指紋圖譜的精密度、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性RSD值均小于5%。處理濃度為40mg/mL時(shí),10批馬齒莧黃酮類化合物提取物對(duì)黃曲霉菌的抑制率為73.47-76.47%,抑菌活性穩(wěn)定。因此確定相似度≥0.97為馬齒莧全草黃酮類化合物提取物的質(zhì)控點(diǎn)。
(3)采用生物活性導(dǎo)向篩選法,考察了馬齒莧全草黃酮類化合物提取物及各級(jí)餾分對(duì)黃曲霉菌生長(zhǎng)的抑制作用,確定了馬齒莧全草黃酮類化合物提取物抑制黃曲霉菌生長(zhǎng)的有效餾分為三級(jí)餾分F6-5-3,其
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