豬抗病相關(guān)基因IRGC、MX1的鑒定、多態(tài)性分析及在優(yōu)質(zhì)豬品系中的應(yīng)用研究.pdf

1、學(xué)校名稱:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)分類號:學(xué)號:單位代碼:10504密級:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬抗病相關(guān)基因1RGC、MXI的鑒定、多態(tài)性分析及在優(yōu)質(zhì)豬品系中的應(yīng)用研究CHARACTERIZATION，POLYMORPHISMANDAPLICATIONINHIGHQUALITYPIGLINEOFPORCINEDISEASERESISTANTGENES一IRGC，MXIGENE研究生:梅書棋指導(dǎo)教師:吳斌教授陳明新研究員學(xué)位類型:獸醫(yī)碩士領(lǐng)域:華

2、中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院中國武漢CollegeofVeterinaryHuazhongAgrieulturalUniversityWuhan，China華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2加8屆碩士學(xué)位論文1.1.1DNA樣品......................................................................................……221.1.2組織樣品.....................

3、...................................................................……221.1.3試驗(yàn)豬群及性狀測定....................................................................……221.2主要儀器和設(shè)備.....................................................

4、................……，，.....……，…221.3主要藥品及試劑.................................……，..............................................……221.4緩沖液和常用試劑的配制.....................................................................……232試驗(yàn)方法.

5、...........................................................................................................……242.1豬基因組ONA的提取...........................................................................……242.2基因組DNA的濃度測定和質(zhì)量

6、檢測...................................................……242.3利用Rl’PCR方法擴(kuò)增cDNA片段......................................................……242.3.1總RNA的提取........................................................................

7、.....……242.3.2cDNA第一鏈的合成..............................................……，...............……252.3.3R’1飛PCR反應(yīng)................................................................................……252.3.4R’FPCR反應(yīng)產(chǎn)物的檢測............

8、................................................……252.4候選基因的確定及引物設(shè)計(jì).................................................................……252.4.1候選基因的確定........................................................................

9、....……262.4.2引物設(shè)計(jì).......................................................................................……262.5PCR產(chǎn)物的回收、純化、克隆測序.....................................................……272.5.1PCR產(chǎn)物回收與純化.....................

10、............……，..................................……272.5.2回收DNA片段與載體的連接..............................……，................……272.5.3感受態(tài)細(xì)胞的制備(Cach法制備感受態(tài))..................................……272.5.4連棒產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化.....................

11、.......................................................……282.5.5陽性克隆子鑒定及測序................................................................……282.6生物信卑學(xué)分析相應(yīng)軟件................................................................

12、......……282.7豬候選基因組序列的擴(kuò)增及部分SNP的PCR一RFLP檢測...............……292.7.1引物設(shè)計(jì).......................................................................................……292.8組織表達(dá)譜分析..................................................

13、....................……，................……293統(tǒng)計(jì)分析.……...................................……，二，，.…，..…，.........……，............……，.........……303.1分子標(biāo)記在不同豬種中的等位基因頻率及基因型頻率計(jì)算.............……303.2分子標(biāo)記的基因效應(yīng)分析......................

14、...............................................……30第三章結(jié)果與分杭....................................................................................................……31l總RNA的提取.................................................

15、...............................................……312豬IRGC基因........……，....................................................................................……312.1根據(jù)豬EST信息設(shè)計(jì)特異性引物及RT一PCR擴(kuò)增結(jié)果....................……312.2豬IRGC基