HPLC同時(shí)檢測(cè)多種非甾體抗炎藥殘留的研究.pdf

1、非甾體抗炎藥(non-steroidalanti-inflammatorydrugs，NASIDs)具有抗炎解熱，緩解疼痛，治療風(fēng)濕性疾病的療效。近年來(lái)，由于養(yǎng)殖業(yè)趨于集約化和大規(guī)?；l(fā)展，非甾體抗炎藥已經(jīng)廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)中。這類(lèi)藥使用泛濫，使養(yǎng)殖周邊的水體以及水體中的生物都受到了一定程度的污染。非甾體抗炎藥會(huì)導(dǎo)致腸胃、肝腎，血液和神經(jīng)系統(tǒng)副反應(yīng)，全世界每天大約有3千萬(wàn)人使用這類(lèi)藥緩解病痛，其中有0.2％～0.4％的患者致死。因此，許多

2、國(guó)家和地區(qū)規(guī)定了非甾體類(lèi)藥物的最大殘留量。目前國(guó)內(nèi)針對(duì)非甾體抗炎藥的檢測(cè)主要是參照中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN/T2190-2008)以及歐盟標(biāo)準(zhǔn)(2002/657/EC)，但還沒(méi)有制定相應(yīng)的國(guó)標(biāo)，為了保障我國(guó)的動(dòng)物源性食品出口貿(mào)易，保障消費(fèi)者的身體健康，確保動(dòng)物源性食品中非甾體抗炎藥殘留量在安全食用范圍內(nèi)，從而建立一種簡(jiǎn)單、快速、可靠、靈敏的檢測(cè)方法是控制殘留量的基礎(chǔ)。
　　 目前對(duì)非甾體抗炎藥殘留檢測(cè)的方法有氣

3、相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、高效液相色譜法、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、毛細(xì)管電泳法等。
　　 本文針對(duì)非甾體抗炎藥的性質(zhì)，選取四種非甾體抗炎藥進(jìn)行研究，分別是：氟尼辛葡甲胺、美洛昔康、酮洛芬和雙氯芬酸鈉。采用酸化后的乙醇結(jié)合超聲波微波輔助提取，并優(yōu)化了凈化條件，高效液相色譜法(HPLC)上樣檢測(cè)，建立了同時(shí)檢測(cè)動(dòng)物源性食品以及水生生物鯽魚(yú)中4種非甾體抗炎藥的殘留檢測(cè)方法，研究成果如下：
　　 1.獲得提取4種非甾體抗炎藥

4、的最佳條件。以羊肉為實(shí)驗(yàn)材料，比較了酸化后的乙腈、甲醇和乙醇有機(jī)溶劑對(duì)4種非甾體抗炎藥提取效果，結(jié)果表明酸化后的乙醇和乙腈的提取回收率較高，考慮到乙腈的毒性較大，對(duì)環(huán)境有害，所以本實(shí)驗(yàn)選取酸化乙醇作為提取劑，在此基礎(chǔ)上，還研究了超聲波、微波以及漩渦震蕩對(duì)提取效果的影響，結(jié)果表明超聲波和微波聯(lián)用輔助提取的效果好。
　　 2.獲得了凈化提取樣品的最佳條件。羊肉組織和鯽魚(yú)組織的成分比較復(fù)雜，在超聲波和微波的作用后釋放出大量的極性(如氨

5、基酸類(lèi))和非極性(如脂類(lèi))雜質(zhì)，通過(guò)液-液萃取和固相萃取的方法使樣品得到較好的凈化。本實(shí)驗(yàn)采用的正己烷萃取了提取液中的非極性成分，研究了C18、硅藻土、氧化鋁和硅膠為填料的固相萃取柱對(duì)4種非甾體抗炎藥的凈化效果。結(jié)果表明以硅藻土為填料的固相萃取柱對(duì)目標(biāo)物保留效果較好。
　　 3.優(yōu)化了色譜條件。色譜柱為HypersilODSC18柱，有報(bào)道采用乙腈-0.1％甲酸(0.5mmol/L乙酸銨)為流動(dòng)相，實(shí)驗(yàn)顯示，峰型較寬和拖尾現(xiàn)象，

6、本實(shí)驗(yàn)對(duì)羊肉組織樣品分析時(shí)進(jìn)行了優(yōu)化，選擇乙腈-0.2％三乙胺水溶液(40:60，v/v，用磷酸調(diào)節(jié)pH到3.5)：流速為0.8ml/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為255nm；礎(chǔ)在對(duì)鯽魚(yú)組織樣品分析時(shí)流動(dòng)相稍有調(diào)整為乙腈-0.1％三乙胺水溶液(60:40，v/v，用磷酸調(diào)節(jié)pH到3.5)，使樣品分析時(shí)間縮短了10min。
　　 4.建立了4種非甾體抗炎藥的同時(shí)檢測(cè)方法。采用高效液相色譜法(二級(jí)管陣列檢測(cè)器)，同時(shí)檢測(cè)出羊肉中氟尼辛葡甲胺