水牛卵母細胞體外成熟和胚胎分割的相關研究.pdf

1、本研究探討了葉酸對水牛卵母細胞體外成熟及早期胚胎發(fā)育的影響,以期提高水牛卵母細胞的成熟率和囊胚發(fā)育率,為后續(xù)胚胎分割的相關研究提供更多的胚胎。同時,本研究還探討不同質量的囊胚、囊胚分割前后冷凍和不同時期的冷凍胚胎對水牛胚胎分割效果的影響,并將分割胚進行胚胎移植,以期生產同卵雙胎的后代并提高水牛胚胎分割的效率。具體研究內容分為以下兩部分:
　　 研究一,探討體外成熟培養(yǎng)液中添加不同濃度的葉酸(1 ng/mL、10ng/mL和100

2、 ng/mL)對水牛卵母細胞體外成熟和早期胚胎發(fā)育的影響。結果發(fā)現(xiàn):(1)10 ng/mL組和100 ng/mL組的卵丘擴展指數(shù)均顯著高于對照組(P＜0.05),而1 ng/mL組與對照組、10 ng/mL組和100 ng/mL組差異均不顯著(P＞0.05);(2)10 ng/mL組的成熟率顯著高于對照組、1ng/mL組和100 ng/mL組(P＜0.05);(3)各組卵母細胞的谷胱甘肽含量差異不顯著(P＞0.05);(4)10 ng/

3、mL組的囊胚發(fā)育率極顯著高于對照組、1ng/mL組和100 ng/mL組(P＜0.01);(5)各組的囊胚細胞數(shù)差異不顯著(P＞0.05)。上述結果表明,成熟培養(yǎng)液中添加10 ng/mL的葉酸能顯著提高水牛卵母細胞的體外成熟率和囊胚發(fā)育率。
　　 研究二,探討不同質量的囊胚、囊胚分割前后冷凍及不同時期的冷凍胚胎對分割效果的影響,并將新鮮和冷凍胚胎的半胚移植給受體。結果表明:(1)A級囊胚的分割成功率、半胚發(fā)育率及半胚細胞數(shù)均極顯

4、著高于B級囊胚和C級囊胚(P＜0.01),且B級囊胚和C級囊胚之間也差異極顯著(P＜0.01);(2)冷凍囊胚的分割成功率與未冷凍囊胚差異不顯著(P＞0.05),但囊胚冷凍后分割組的半胚發(fā)育率顯著高于分割后冷凍組(P＜0.05);(3)擴張囊胚的冷凍存活率顯著高于孵化囊胚(P＜0.05),但囊胚與擴張囊胚、孵化囊胚差異不顯著(P＞0.05),囊胚、擴張囊胚和孵化囊胚凍胚的分割成功率、半胚發(fā)育率差異均不顯著(P＞0.05);(4)將分割獲