十子代平方抑制α-葡萄糖苷酶及改善GK大鼠糖代謝作用實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察中藥十子代平方對(duì)T2DM GK大鼠糖代謝的影響，明確總方、10味組方中藥及其主要單體成分對(duì)α－葡萄糖苷酶的作用，初步闡釋十子代平方的降血糖作用機(jī)理，為今后組分中藥研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：SPF級(jí)雄性13周齡GK大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后給予高脂飼料連續(xù)喂養(yǎng)4周，以隨機(jī)血糖或糖負(fù)荷2小時(shí)血糖≥11.1 mmol/L[1]為成模標(biāo)準(zhǔn)，將成模GK大鼠隨機(jī)分為模型組、阿卡波糖組(13.38mg/kg)、十子代平方低

2、、中、高劑量組（分別含生藥4g/kg,8g/kg,16g/kg），每組8只；另選同齡等量健康Wistar大鼠為正常組，給予普通飼料喂養(yǎng)。第一次給藥前、給藥4周末、給藥8周末檢測(cè)GK大鼠葡萄糖耐量（OGTT），計(jì)算糖耐量曲線(xiàn)下面積。給藥前、給藥8周分別檢測(cè)空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（PG2H），給藥8周檢測(cè)糖化血紅蛋白(HbAlc)。2體外實(shí)驗(yàn)：建立并優(yōu)化α－葡萄糖苷酶抑制劑體外篩選模型，以蔗糖為底物、阿卡波糖為陽(yáng)性對(duì)照，應(yīng)用不同濃

3、度十子代平方水煎劑及組方單味中藥、中藥主要單體成分水提液進(jìn)行干預(yù)，觀察各藥物組對(duì)α－葡萄糖苷酶活性的影響。利用葡萄糖氧化酶法測(cè)定十子代平方、10味組方中藥及其主要單體成分對(duì)α－葡萄糖苷酶的吸光度（OD值）并計(jì)算各藥物組對(duì)α－葡萄糖苷酶的抑制率及IC50。
　　結(jié)果：1體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示，十子代平方能夠降低T2DM GK大鼠空腹血糖、餐后2h血糖，各劑量組與模型組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異（P＜0.05，P＜0.01），且作用效果呈劑量依賴(lài)

4、性。十子代平方能夠降低T2DM GK大鼠HbAlc水平，各劑量組較模型組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異（P＜0.05）。治療4周后，各劑量組十子代平方大鼠的OGTT曲線(xiàn)下面積與模型組相比未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05）；治療8周后,各劑量組十子代平方大鼠的OGTT曲線(xiàn)下面積與模型組相比仍無(wú)顯著性差異（P＞0.05），但其OGTT曲線(xiàn)下面積與治療前相比均有一定程度減小，且呈劑量依賴(lài)性。2體外實(shí)驗(yàn)顯示，十子代平方、10味組方中藥及其主要單體成分對(duì)α－葡

5、萄糖苷酶均有一定抑制作用。其中，十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子和單體成分迷迭香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)α－葡萄糖苷酶的抑制作用較強(qiáng)，呈明顯的濃度-效應(yīng)關(guān)系。當(dāng)濃度為125mg/mL時(shí)，十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子對(duì)α－葡萄糖苷酶的抑制率分別為60.20％、55.32%、50.67%、54.01%、53.13%、58.49%，同濃度阿卡波糖的抑制率為87.69%；當(dāng)濃度為40mmol/L時(shí)，迷迭

6、香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)α－葡萄糖苷酶的抑制率分別為93.52%、87.10%、78.11%，同濃度阿卡波糖(25.82mg/mL)的抑制率為90.89%。十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子、迷迭香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽和阿卡波糖抑制α－葡萄糖苷酶的 IC50分別為16.057mg/mL、44.401mg/mL、89.608mg/mL、72.146mg/mL、82.139mg/mL、21.549mg/mL、0

7、.412mg/mL、0.605mg/mL、0.806mg/mL和0.376mg/mL。
　　結(jié)論：1十子代平方能夠降低T2DM GK大鼠空腹血糖、餐后2h血糖和糖化血紅蛋白水平，加快體內(nèi)糖代謝，改善糖耐量受損狀態(tài)，減輕胰島素抵抗。2十子代平方、10味組方中藥及其10種單體成分對(duì)α－葡萄糖苷酶均有一定抑制作用。其中，十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子和迷迭香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽能夠顯著抑制α－葡萄糖苷酶活性，具