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1、本文采用生物活性(α-葡萄糖苷酶活性)指導(dǎo)下的導(dǎo)向分離技術(shù)從中藥虎杖中分離和純化了具有顯著α-葡萄糖苷酶抑制活性的兩種物質(zhì)-A和B。首次確認(rèn)這兩種成分對(duì)α-葡萄糖苷酶和醛糖還原酶都具有強(qiáng)烈的抑制活性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示:兩種物質(zhì)均能明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及正常小鼠的餐后血糖。本文側(cè)重探討了活性組分的篩選、分離提取和純化工藝以及兩種組分的化學(xué)、酶學(xué)性質(zhì)及體內(nèi)降血糖活性。 活性物質(zhì)分離提取和純化的主要工藝路線:乙醇浸提→石油醚脫脂
2、→乙酸乙酯萃取→硅膠柱層析→濃縮干燥。得到HPLC純度分別為96.3%和99%以上的兩種組分,經(jīng)紅外、質(zhì)譜、核磁共振及相關(guān)化學(xué)方法定性分析,初步確定分別為大黃素類物質(zhì)(下文簡(jiǎn)稱A)和二苯乙烯類物質(zhì)(下文簡(jiǎn)稱B)。酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)表明:物質(zhì)A對(duì)α-葡萄糖苷酶為競(jìng)爭(zhēng)性抑制,比活性為298U/mg,Km=0.179mmol/L,Ki=3.09μg/mL;物質(zhì)B對(duì)α-葡萄糖苷酶為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制,比活性為408U/mg,Km=0.182mmol/
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