基于基因芯片技術(shù)的王漿高產(chǎn)性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選.pdf

1、蜂王漿(royal jelly)是由適齡工蜂發(fā)達(dá)的咽下腺和上顎腺分泌的，用于飼喂蜂王及3日齡以內(nèi)幼蟲(chóng)，含有豐富的功能組分，對(duì)人類醫(yī)療、保健等具有獨(dú)特功效。通過(guò)多年的定向選育與集團(tuán)繁育，我國(guó)成功培育出王漿產(chǎn)量世界領(lǐng)先的優(yōu)良王漿高產(chǎn)蜂種。以王漿高產(chǎn)蜂種為素材，研究王漿高產(chǎn)性狀相關(guān)的基因水平的分子標(biāo)記及王漿高產(chǎn)分子機(jī)制具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。
　　 本研究通過(guò)定向選育手段，在同一蜂種中分別培育了王漿高產(chǎn)和王漿低產(chǎn)蜜蜂(x vsy

2、，F(xiàn)1，16=66.04，P=0.0002)。根據(jù)從NCBI上檢索的9792條已注釋的蜜蜂基因、本實(shí)驗(yàn)室在蜜蜂幼蟲(chóng)中新檢測(cè)的1722條基因和175條與王漿分泌可能緊密相關(guān)的基因，設(shè)計(jì)和制備了蜜蜂基因芯片(Agilent)，分別與王漿高產(chǎn)蜜蜂（HRJB）及王漿低產(chǎn)蜜蜂(LRJB)中正在吐漿的哺育蜂的頭部cDNA進(jìn)行雜交，初步篩選出369條差異表達(dá)的基因，其中在王漿高產(chǎn)蜜蜂中上調(diào)表達(dá)的基因有201個(gè)(1.70％)，下調(diào)表達(dá)168個(gè)(1.43

3、％)。并運(yùn)用高級(jí)生物信息學(xué)分析軟件對(duì)基因芯片所得到的369個(gè)差異表達(dá)基因進(jìn)行主成分分析、聚類分析、GO分析和Pathway分析，結(jié)果表明，差異表達(dá)基因主要參與了器官組織的發(fā)育調(diào)控過(guò)程、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的合成與沉積過(guò)程、氧化還原輔酶與葡萄糖的代謝過(guò)程和有機(jī)酸的合成與代謝過(guò)程;分子功能主要為神經(jīng)肽及受體活性、物質(zhì)代謝酶活性;參與信號(hào)通路、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)合成代謝、蛋白質(zhì)加工及修飾代謝途徑共有46個(gè)。
　　 最后，通過(guò)qRT-PCR技術(shù)對(duì)基因芯片檢測(cè)