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文檔簡介
1、目的:擬通過慢性苯并(a)芘染毒大鼠,觀察苯并(a)芘對學(xué)習(xí)記憶相關(guān)通路基因表達(dá)的影響,探討苯并(a)芘影響學(xué)習(xí)記憶的可能機(jī)制,評估其在職業(yè)醫(yī)學(xué)與環(huán)境醫(yī)學(xué)中的意義。
方法:選取初斷乳雄性SD大鼠27只,隨機(jī)分為3組:溶劑對照組、苯并(a)芘90天劑量組和45天劑量組(6.25rag/kg體重)。每組9只,每周2次(周一,周五)定時腹腔注射,45天劑量組連續(xù)給藥7周,其余兩組連續(xù)給藥14周。染毒結(jié)束后,將大鼠斷頭處死,立即取
2、出腦組織,游離出海馬,應(yīng)用DNA微陣列(DNA microarray)技術(shù)分析苯并(a)芘慢性暴露后大鼠海馬組織的基因表達(dá)譜變化,篩選出差異表達(dá)基因,通過用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測Gri n2a,adralb,Gabra5,Egr2,Accn2,Pmch,Drd2,Grial基因表達(dá)情況,與基因芯片結(jié)果進(jìn)行比較與驗(yàn)證。
結(jié)果:(1)基因芯片結(jié)果顯示,高劑量組和溶劑對照組間存在差異表達(dá)的基因有547條,其中高劑量染毒組/對
3、照組比較表達(dá)上調(diào)≥2倍的基因237個,比較表達(dá)下調(diào)≥2倍的基因310個基因。(2)通過對差異表達(dá)基因的生物信息學(xué)分析,主要涉及細(xì)胞凋亡和應(yīng)激反應(yīng)蛋白、細(xì)胞間通信因子、細(xì)胞增值相關(guān)基因、生長發(fā)育相關(guān)基因、生物調(diào)節(jié)代謝相關(guān)基因等13大類功能相關(guān)基因。(3)實(shí)時熒光定量PcR檢測方法驗(yàn)證其中8個學(xué)習(xí)記憶相關(guān)基因表達(dá)情況,與基因芯片結(jié)果一致。
結(jié)論:在苯并(a)芘暴露下,學(xué)習(xí)記憶能力下降涉及多通路基因協(xié)同調(diào)控,包括鈣離子信號通路、
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