利用固定化醋酸菌制備高濃度蘋(píng)果梨醋的研究.pdf

1、醋酸菌屬于好氧性的細(xì)菌，研究發(fā)現(xiàn)醋酸菌可以通過(guò)代謝作用將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸。因其特有的轉(zhuǎn)化能力以及大量分布于自然界各處，在工業(yè)生產(chǎn)食用醋的發(fā)酵工藝中起著至關(guān)重要的作用。
　　在本文涉及到的實(shí)驗(yàn)中，從蘋(píng)果、芒果、香蕉、橙子、蘋(píng)果梨、西紅柿等6種水果和蔬菜樣品以及延邊大學(xué)后山蘋(píng)果梨根部土壤樣品、龍井蘋(píng)果梨果樹(shù)根部土壤樣品中分離出516種微生物，其中通過(guò)溴甲酚紫培養(yǎng)基法篩選出醋酸菌223種。
　　由于YEGA培養(yǎng)基中含有溴甲酚紫，在醋

2、酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸時(shí)形成的酸環(huán)境，促使紫色的溴甲酚紫變成黃色，在菌株周?chē)纬牲S色條帶。周?chē)牲S色條帶的醋酸菌株經(jīng)過(guò)分離、純化等實(shí)驗(yàn)步驟得到單一的醋酸菌菌株。
　　通過(guò)對(duì)不同發(fā)酵溫度、菌株接種量、初始酒精濃度、反應(yīng)容器中發(fā)酵液的體積等條件進(jìn)行正交分析，進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生高濃度乙酸的高效醋酸菌，并進(jìn)行發(fā)酵條件優(yōu)化。
　　通過(guò)發(fā)酵用培養(yǎng)基的選定、培養(yǎng)基成分的價(jià)格、發(fā)酵溫度的高低、初始發(fā)酵 pH等條件綜合考慮、計(jì)算，最終選出能在

3、物美價(jià)廉的條件下，短時(shí)間內(nèi)達(dá)到最高醋酸濃度的高效醋酸菌。
　　利用海藻酸鈉，對(duì)高效醋酸菌進(jìn)行固定化。探討每一株醋酸菌的最佳固定化條件，并制作高效菌株的醋酸菌載體用于蘋(píng)果梨醋的發(fā)酵。在實(shí)驗(yàn)溫度30℃、菌株接種量20％、反應(yīng)容器中發(fā)酵液體積50%、初始酒精濃度8%的條件下連續(xù)震蕩發(fā)酵發(fā)現(xiàn)，從土壤樣品中分離出的菌株AAB-13和AAB-14產(chǎn)酸能力最為突出，AAB-13的最高產(chǎn)酸量為7.7%、AAB-14最高產(chǎn)酸量為7.8%。
　

4、　對(duì)高效菌株進(jìn)行了DNA測(cè)序鑒定，并根據(jù)測(cè)序結(jié)果構(gòu)建了無(wú)根系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，結(jié)合形態(tài)學(xué)確定了菌株AAB-13菌株屬于葡萄糖桿菌屬(Gluconacetobacter)，菌株AAB-14屬于醋酸桿菌(Acetobacter)。
　　利用高效菌株AAB-13和AAB-14的固定化載體，按照最佳反應(yīng)條件進(jìn)行二段式的連續(xù)發(fā)酵10個(gè)周期。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，屬于醋酸桿菌(Acetobacter)的AAB-14在連續(xù)發(fā)酵過(guò)程中出現(xiàn)了醋酸的過(guò)氧化反應(yīng)。發(fā)酵達(dá)到