我國菰米中膳食纖維、類黃酮的分析及其對非酒精性肝脂肪變性HepG2細(xì)胞作用的研究.pdf

1、目的:
　　 (1)提取菰米、玉米、蘋果、芹菜膳食纖維及菰米、玉米類黃酮，對其含量進(jìn)行測定及比較，探討各類膳食纖維及類黃酮產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 (2)觀察各種提取的膳食纖維、類黃酮對油酸誘導(dǎo)的HepG2非酒精性脂肪肝細(xì)胞漿內(nèi)的甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量的影響，探討不同種類的膳食纖維、類黃酮對非酒精性肝脂肪變性細(xì)胞作用的效果差異。
　　 (3)觀察非酒精性肝脂肪變

2、性細(xì)胞內(nèi)過氧化物酶體增殖體激活受體-α(PPAR-α)、肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶-1A(CPT-1A)在mRNA水平上的影響，探討菰米、玉米、芹菜、蘋果膳食纖維及菰米、玉米類黃酮對非酒精性肝脂肪變性細(xì)胞的作用機(jī)制。
　　 方法:
　　 (1)用酶-化學(xué)法提取菰米、玉米中膳食纖維，用化學(xué)法提取蘋果、芹菜的膳食纖維，按國標(biāo)法對其含量進(jìn)行測定;用浸提回流法提取菰米、玉米的類黃酮，用比色法對其含量進(jìn)行測定。
　　 (2)用油酸誘導(dǎo)

3、HepG2細(xì)胞建立體外非酒精性肝脂肪變性模型，通過MTT、油紅O染色及檢測細(xì)胞漿內(nèi)TG的含量，來確定油酸的濃度。
　　 (3)油酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞脂肪變性，加入菰米、玉米、芹菜、蘋果膳食纖維及菰米、玉米類黃酮，觀察對細(xì)胞漿內(nèi)TG、MDA、SOD含量的變化;同時測定細(xì)胞內(nèi)PPAR-α及CPT-1AmRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 (1)菰米膳食纖維總膳食纖維(TDF)的含量7.242g/100g，玉米TDF的

4、含量9.13g/100g，均高于大米;蘋果TDF占預(yù)處理蘋果粉的含量為13.52％，芹菜TDF占預(yù)處理芹菜粉的含量為38.6％;菰米類黃酮的含量3.674g/100g，顯著高于玉米類黃酮的含量。
　　 (2)0.5mM的油酸對細(xì)胞活性無顯著影響，且細(xì)胞內(nèi)TG顯著升高，細(xì)胞內(nèi)脂滴蓄積明顯，是誘導(dǎo)脂肪變性的最佳濃度。
　　 (3)100μg/ml菰米、玉米膳食纖維能降低HepG2非酒精性肝脂肪變性細(xì)胞漿中TG、MDA含量，升

5、高SOD含量，對非酒精性肝脂肪變性具有一定的改善作用，芹菜膳食纖維的作用次之，而蘋果膳食纖維的作用不明顯;100μg/ml菰米、玉米類黃酮也降低模型細(xì)胞漿內(nèi)的TG含量。
　　 (4)與非酒精性肝脂肪變性細(xì)胞模型組相比，菰米、玉米、芹菜膳食纖維及菰米、玉米類黃酮處理的細(xì)胞內(nèi)PPAR-α及CPT-1AmRNA的表達(dá)顯著增高(P＜0.05)，而蘋果膳食纖維PPAR-α及CPT-1AmRNA的表達(dá)稍有增高，但沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05

6、）。
　　 結(jié)論:
　　 (1)0.5mM的油酸與HepG2細(xì)胞孵育24小時，能誘導(dǎo)脂肪變性，形成非酒精性肝脂肪變性細(xì)胞模型。
　　 (2)菰米、玉米膳食纖維及類黃酮對非酒精性肝脂肪變性細(xì)胞具有一定的改善作用，作用的機(jī)制可能是激活PPAR-α，促進(jìn)CPT-1A的表達(dá)，增加脂肪酸分解，減少體脂含量，延緩脂肪肝形成。
　　 (3)芹菜膳食纖維也能改善非酒精性肝脂肪變性，而蘋果膳食纖維的作用則較小。可能的原因是