胰蛋白酶及其制劑的毒理學(xué)試驗(yàn)研究.pdf

1、胰蛋白酶(Trypsin)是最早發(fā)現(xiàn)于胰液消化蛋白質(zhì)中的酶。胰蛋白酶在脊椎動(dòng)物消化系統(tǒng)中是一種重要的消化酶，其在胰臟中先以胰蛋白酶原的形式而被合成，然后隨胰液從胰島管進(jìn)入小腸，在小腸內(nèi)經(jīng)腸激酶激活后活化為胰蛋白酶。胰蛋白酶能特異性的切斷多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基的羧基側(cè)。胰蛋白酶還能激活其他一些酶的前體，例如羧肽酶原、糜蛋白酶原等，是一種特異性非常強(qiáng)的蛋白酶。胰蛋白酶作為一種蛋白水解酶，能降解變性的蛋白質(zhì)，對(duì)未變性的蛋白質(zhì)則不起作用。因

2、此，胰蛋白酶能分解膿液、血凝塊等，利于膿液的引流排除，從而使壞死創(chuàng)面凈化速度加快，并能促進(jìn)肉芽組織的新生。在人醫(yī)臨床上主要用于膿胸、血胸、瘺管等所產(chǎn)生的局部水腫、膿腫的治療，也用于毒蛇咬傷治療;在生物科技上常用于細(xì)胞培養(yǎng)。目前關(guān)于胰蛋白酶在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用報(bào)道鮮見，胰蛋白酶尚未作為獸用藥物在國內(nèi)進(jìn)行注冊(cè)。依照農(nóng)業(yè)部獸藥評(píng)審中心獸藥注冊(cè)資料匯編的毒理學(xué)試驗(yàn)規(guī)定，本研究對(duì)胰蛋白酶原料藥進(jìn)行了包括小鼠急性毒性試驗(yàn)、大鼠30天喂養(yǎng)亞慢性毒性試驗(yàn)

3、、小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)，以及復(fù)合蛋白酶乳房注入劑在家兔的皮膚和黏膜刺激試驗(yàn)、皮膚致敏試驗(yàn)在內(nèi)的一般毒理學(xué)試驗(yàn)研究。
　　給小鼠灌服劑量分別為40 mg/kg，200mg/kg，1000mg/kg，5000mg/kg和8000 mg/kg的胰蛋白酶原料藥進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果顯示，胰蛋白酶的LD50＞5000 mg/kg，根據(jù)化學(xué)物質(zhì)急性毒性劑量分級(jí)表判定胰蛋白酶原料藥屬于實(shí)際無毒物質(zhì);給大鼠灌服為期30 d的劑量分別為高劑量(80

4、0 mg/kg)、中劑量(400 mg/kg)、低劑量(200 mg/kg)的胰蛋白酶原料藥進(jìn)行亞慢性毒性試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果顯示，各個(gè)劑量組的大鼠均未出現(xiàn)明顯中毒情況，受試大鼠的血液常規(guī)、血液生化指標(biāo)中盡管有個(gè)別指標(biāo)與對(duì)照組相比有顯著差異，但數(shù)值均處于正常范圍內(nèi)，臟器系數(shù)指標(biāo)與對(duì)照組均無顯著差異，病理組織學(xué)檢查也未見異常。將復(fù)合蛋白酶乳房注入劑涂在家兔背部完整皮膚，觀察其對(duì)皮膚的刺激和致敏情況;同時(shí)將復(fù)合蛋白酶乳房注入劑注入家兔陰道，觀察其