毒理學急性皮膚毒性試驗

1、急性皮膚、眼刺激試驗,前言：安全性評價所需毒理學資料,?中國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》2007化妝品的新原料，一般需進行下列毒理學試驗：?急性經(jīng)口和急性經(jīng)皮毒性試驗?皮膚和急性眼刺激性/腐蝕性試驗?皮膚變態(tài)反應試驗?皮膚光毒性和光敏感試驗（原料具有紫外線吸收特性需做該項試）?致突變試驗（至少應包括一項基因突變試驗和一項染色體畸變試驗）?亞慢性經(jīng)口和經(jīng)皮毒性試驗?致畸試驗；?慢性毒性/致癌性結合試驗?毒物代謝及動力學試驗?根

2、據(jù)原料的特性和用途，還可考慮其它必要的試驗，如果該新原料與已用于化妝品的原料化學結構及特性相似，則可考慮減少某些試驗? 今后有可能根據(jù)具體情況提出具體要求,?歐盟? SCCP評價“化妝品規(guī)程”附件中的物質所需的毒理學資料 一、一般性毒理學資料 1.毒理學試驗研究資料 2.其他資料 二、對于在“化妝品規(guī)程”附件III和IV列出的染發(fā)劑的特殊要求 ? 企業(yè)安全性評價員對“化妝品規(guī)程”附件以外化妝品成分安全性評價的毒理

3、學資料要求,?歐盟? SCCP評價“化妝品規(guī)程”附件中的物質所需的毒理學資料一般性毒理學資料——毒理學試驗研究資料 1.急性毒性（有的話） 7.致癌性 2.刺激性和腐蝕性 8.生殖毒性 3.皮膚過敏性 9.毒代動力學 4.皮膚/經(jīng)皮吸收 10.光誘發(fā)毒性 5.重復染毒毒性 11.人體資料 6.致突變性/遺傳毒性,?歐盟?對于在“化妝品規(guī)程”附件III和I

4、V列出的染發(fā)劑的特殊要求 需提供下列3項試驗： 1. 細菌回復突變試驗 2. 體外哺乳動物細胞基因突變試驗（優(yōu)選小鼠 淋巴瘤試驗） 3. 體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗或體外哺 乳動物細胞微核試驗。 當上述3項試驗結果以及定量構效關系、理化特性等顯示，受試染發(fā)劑可能具有致突變性或遺傳毒性時，可能要求增加致突變試驗項目。,?歐盟 ? 企業(yè)安全性評價員對“化妝品規(guī)程”附件以

5、外化妝品成分安全性評價的毒理學資料要求 1. 急性毒性（經(jīng)口、經(jīng)皮或吸入） 2. 皮膚和眼刺激性 3. 過敏性 4. 致突變性,急性皮膚、眼刺激性實驗,【實驗目的】【實驗原理】【實驗材料】【實驗方法】【實驗結果】【實驗報告】,【實驗目的】,確定和評價化妝品原料及其產(chǎn)品對哺乳動物皮膚局部是否有刺激作用或腐蝕作用及其程度。,【實驗原理】,皮膚接觸受試物后，化妝品中含有的原發(fā)性

6、刺激物質刺激皮膚神經(jīng)末梢使血管擴張、滲出而產(chǎn)生相應的可逆性炎癥反應。根據(jù)反應的強弱記錄積分，評價受試物的刺激強度。,1.儀器 動物體重稱、外科剪刀、燒杯、棉簽等2.實驗動物健康成年豚鼠或家兔，每種受試物4-8只。3.試劑 蒸餾水、脫毛劑(10%硫化鈉)，待檢化妝品2種,【實驗材料】,【實驗方法】,l. 選擇健康實驗動物，稱重、編號，檢查動物雙眼有無異常2. 去毛:在家兔腹部選3塊2×2cm2的面積，用剪刀小心剪毛，注

7、意不可損傷表皮，剪毛后用棉簽蘸取脫毛劑去除殘毛，使皮膚完全顯露。去毛后用水清洗殘留脫毛劑，并用棉簽擦干。3. 取受試物0.5ml(固體取0.5g)，分別涂在家兔顯露皮膚上，并選一處涂以蒸餾水作為對照，作好定位記錄。4. 輕輕拉開實驗動物一側的下眼瞼，將受試物0.1ml(固體取0.lg)滴入或涂入一側目結膜囊內(nèi)，另一則用賦形劑作為對照，給受試物后使眼睛閉合一段時間，用生理鹽水沖洗（不同受試物規(guī)定不同）。5. 1小時后觀察皮膚、眼結膜

8、、角膜、虹膜反應。,附:評分標準(摘自GB7919) 表1 皮膚刺激反應評分,附表2 皮膚刺激強度評價,【實驗結果】,刺激反應積分和刺激強度評價,眼刺激觀察,表1 眼損害的評分標準,表 2 眼刺激性反應分級,表 3 眼刺激性反應分級,注：當角膜、虹膜、結膜積分為0時，可判為無刺激性。,表4 眼刺激性反應觀察結果,實驗條件： 不沖洗□30秒沖洗□,實驗報告,包括內(nèi)容：目的原理內(nèi)容材料和

9、試劑操作步驟實驗結果結果評定,其中應包含以下內(nèi)容試驗報告應包括如下內(nèi)容：1.受試物名稱、理化性狀、配制方法和用量，必要時說明受試物的pH值；2.實驗動物的種屬、品系和來源（注明合格證號和動物級別）；3.實驗動物飼養(yǎng)環(huán)境，包括飼料來源、室溫、相對濕度、實驗動物房合格證號；4.列表顯示每只動物在每一觀察時點（如染毒1，24，48和72h）的刺激反應（建議的表格形式見表4），將實驗條件不沖洗和30秒沖洗的結果分別列表；5.具