糖腎方對(duì)Ⅰ型糖尿病腎病大鼠腎組織TLR4及MCP-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察Toll樣受體4(TLR4)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)在Ⅰ型糖尿病腎病模型中的表達(dá)，應(yīng)用糖腎方干預(yù)后，觀察糖腎方對(duì)腎組織中二者表達(dá)的影響，探討其在糖腎早期發(fā)展過(guò)程中的可能作用機(jī)制。
　　方法:50只清潔級(jí)雄性SD大鼠，分為空白組(B，n=10)與實(shí)驗(yàn)組40只。單側(cè)腎切除后實(shí)驗(yàn)組予單次55mg/kg腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)，空白組僅予等量檸檬酸緩沖液。72h后測(cè)量尾靜脈隨機(jī)血糖，

2、連續(xù)三次≥16.7mmol/l為造模成功。造模成功的40只大鼠隨機(jī)分為模型組(M，n=10)、中藥組(T，n=10)、氯沙坦組(L，n=10)、中西組(T+L，n=10)。1周后以灌胃的方式給予各組干預(yù)，8周后處死大鼠，留取標(biāo)本。分別于第4周、第8周末代謝籠留取24h尿液，測(cè)定24h尿蛋白。血清學(xué)檢測(cè)空腹血糖、肌酐、尿素氮、低密度脂蛋白水平;HE、Masson染色法觀察腎臟病理改變;免疫組化法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)大鼠腎組織TLR4

3、、MCP-1蛋白及mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果:1.生化指標(biāo)
　　1.124h尿蛋白:與空白組相比，4周和8周糖尿病腎病模型大鼠24小時(shí)尿蛋白定量明顯升高(P＜0.05)，8周時(shí)升高更明顯。4周時(shí)，與模型組相比，糖腎方組、氯沙坦組、中西組24h尿蛋白量無(wú)明顯差異（P＞0.05）;第8周末，糖腎方組、氯沙坦組、中西組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量明顯低于模型組(P＜0.05);與中西組比較，糖腎方組及氯沙坦組24h尿蛋白定量升高(P＜

4、0.05);糖腎方組與氯沙坦組比較差異不明顯(P＞0.05)。
　　1.2肌酐、尿素氮:8周后，空白組大鼠Scr、BUN數(shù)值均正常;與空白組相比，模型組、糖腎方組、氯沙坦組、中西組Scr、BUN數(shù)值均有不同程度升高（P＜0.05）;各治療組Scr、BUN均低于模型組（P＜0.05），各治療組間差異不明顯(P＞0.05)。
　　1.3空腹血糖:與空白組相比較，各治療組空腹血糖明顯升高(P＜0.05);治療組與模型組比較差異無(wú)統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　1.4低密度脂蛋白:各治療組LDL-C均升高，明顯高于空白組(P＜0.05);與模型組比較，糖腎方組、氯沙坦組、中西組LDL-C下降明顯(P＜0.05)，各治療組間則無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　2.HE、Masson染色
　　光鏡下，HE染色:空白組腎小球結(jié)構(gòu)完整，腎小球未見(jiàn)肥大，無(wú)細(xì)胞增生，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)無(wú)明顯改變，腎小管未見(jiàn)明顯異常。模型組腎小球基底膜增厚，系膜基質(zhì)增生，可

6、見(jiàn)部分毛細(xì)血管腔塌陷，小管上皮細(xì)胞腫脹;Masson染色可見(jiàn)模型組纖維組織增生，并伴有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，藥物干預(yù)組上述改變較輕。
　　3.免疫組化法檢測(cè)TLR4及MCP-1表達(dá)
　　模型組與糖腎方組、氯沙坦組、中西組TLR4、MCP-1蛋白表達(dá)量較空白組明顯升高(P＜0.05);與模型組比較，各治療組蛋白表達(dá)量降低明顯(P＜0.05)，中西組降低更為顯著(P＜0.05)，余治療組間相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　

7、　4.腎組織TLR4及MCP-1 mRNA表達(dá)
　　與空白組相比較，各組TLR4 mRNA表達(dá)量明顯增加(P＜0.05);與模型組相比，各治療組TLR4 mRNA表達(dá)量明顯下降(P＜0.05)，中西組效果更佳(P＜0.05)，糖腎方組與氯沙坦組TLR4 mRNA表達(dá)量無(wú)差異(P＞0.05)。各組MCP-1mRNA表達(dá)量與TLR4 mRNA表達(dá)量改變相似。
　　結(jié)論:STZ誘導(dǎo)單側(cè)腎切除大鼠腎臟病理改變明顯，腎組織中TLR4、