夏秋綠茶中茶氨酸的提取分離純化及對腸道微生態(tài)的影響.pdf

1、茶氨酸是茶葉中特有的氨基酸，具有抗腫瘤，增強記憶力等多種活性，在功能食品方面有很大的應(yīng)用前景。中國夏秋綠茶產(chǎn)量高，但年年積壓嚴重，資源利用率低。從夏秋綠茶中直接提取，分離茶氨酸，能更好的保證其天然性質(zhì)，是最直接，安全和有效的生產(chǎn)途徑。本研究擬在前人研究的基礎(chǔ)上，采用提取優(yōu)化，超濾，靜態(tài)吸附，動態(tài)層析結(jié)合的方法，建立一套純度高，成本低，工業(yè)可行的茶氨酸提取分離和純化的工藝，并研究該工藝制備得到的茶氨酸對腸道微生態(tài)的影響。主要研究結(jié)果如下:

2、
　　1.利用正交試驗優(yōu)化得出荼氨酸提取的最佳條件為:提取料液比1∶20，提取溫度95℃，提取時間45min。
　　2.直接水提的茶湯中含有大分子蛋白質(zhì)，高分子多糖及絮狀沉淀，需經(jīng)過超濾處理。通過比較選擇10K孔徑的膜，操作壓力為0.3MPa，溶液溫度35℃時具有最佳的效果。經(jīng)過超濾處理后的荼湯澄澈明凈，大分子蛋白質(zhì)和絮狀沉淀基本去除，茶多糖除掉40％以上，茶多酚去除率達到30％，而咖啡堿和荼氨酸的量處理前后改變不大。

3、>　　3.吸附能進一步除去茶湯中的茶多酚等物質(zhì)，本研究表明PA樹脂對茶多酚的選擇吸附量達到了76.36mg/g，且回收率高，對茶氨酸吸附量很少，利用PA樹脂靜態(tài)吸附可以很好的分離和富集茶多酚。
　　4.分離荼氨酸和咖啡堿用的是NKA-Ⅱ樹脂動態(tài)層析，上樣后用蒸餾水以1BV/h的流速洗脫得到純度99.12％的茶氨酸，一次得率59.26％，1.5-2.5BV之間的洗脫液濃縮后再次上樣，茶氨酸的得率可提高至75.12％,之后用80％乙醇

4、洗脫層析柱可得到純度99％的咖啡堿副產(chǎn)品。NKA-Ⅱ樹脂使用五次后分離效果沒有明顯的改變，具有很好的工業(yè)應(yīng)用前景。
　　5.采用體外厭氧糞樣混合培養(yǎng)的方式對茶氨酸產(chǎn)品進行發(fā)酵培養(yǎng)，通過FISH技術(shù)對24小時內(nèi)有益茵群、有害菌群以及總菌群的數(shù)量變化進行測定，運用HPLC測定24h內(nèi)腸道短鏈脂肪酸的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)茶氨酸在一定程度上能促進乳酸菌和真細菌梭菌屬的生長，對其它三種細菌有一定的抑制作用，細菌總數(shù)比空白對照組略低。腸道短鏈脂肪酸