辣根中異硫氰酸酯的制備和生物活性研究.pdf

1、辣根(Armoracia lapathifolia Gilib.)為十字花科辣根屬多年生草本植物。近年來，研究發(fā)現(xiàn)辣根異硫氰酸酯具有很好的抑菌、殺蟲、抗癌等生物活性。
　　本論文研究了辣根根莖中苯乙基異硫氰酸酯單體的制備方法及其化學(xué)結(jié)構(gòu)，建立了苯乙基異硫氰酸酯的HPLC分析方法。通過單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化了辣根硫代葡萄糖苷的水解工藝和苯乙基異硫氰酸酯的提取工藝。篩選不同大孔樹脂，研究大孔樹脂對辣根異硫氰酸酯的吸附和解附性能，分離純化

2、樣品，研究其體外抗菌的生物活性。
　　為了提高辣根根莖不同提取部位的利用，采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化辣根硫代葡萄糖苷的提取工藝。采用比色法和氣相色譜，分析辣根硫代葡萄糖苷水解液中單糖組分和相對含量。
　　辣根硫代葡萄糖苷經(jīng)過水解，石油醚提取和硅膠柱層析分離，制備得到95％以上的單體，通過IR、UV、MS、NMR進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定該化合物為苯乙基異硫氰酸酯。建立辣根苯乙基異硫氰酸酯的HPLC分析方法。色譜柱：Hypersil ODS2

3、(Φ4.6 mm×250 mm,5μm)，流動相:甲醇:水=70:30(v/v)，檢測波長243 nm，流速1 mL/min。
　　通過單因素和正交試驗(yàn)因子設(shè)計(jì)，優(yōu)化辣根硫代葡萄糖苷的水解工藝，結(jié)果表明：水浴水解：溫度40℃、時間140 min、pH7.0、Vc的添加量為2 mg/g、料液比1:15 g/mL和顆粒大小60目。超聲波輔助水解：功率20 W、時間35 min、pH7.0、料液比1:10 g/mL或1:15 g/mL和

4、Vc的添加量為2 mg/g。
　　研究了辣根水解濾渣部分的熱回流提取苯乙基異硫氰酸酯的最佳工藝。熱提取條件為：溫度60℃、時間3/2 h、料液比1:10 g/mL、溶劑石油醚或乙酸乙酯。比較研究了3種水解提取方法，水蒸氣蒸餾得到的苯乙基異硫氰酸酯的相對含量最高。
　　篩選8種不同大孔樹脂對辣根異硫氰酸酯的吸附和解附性能，異硫氰酸酯的較佳吸附樹脂為X-5或AB-8，辣根異硫氰酸酯經(jīng)X-5吸附富集后，純度達(dá)到46.9%，得率為0

5、.19%。
　　異硫氰酸酯粗提物通過薄層層析考察了不同展開劑的層析效果，當(dāng)石油醚:乙酸乙酯=10:1(v/v)時，得到較好的分離。含23.7%的粗異硫氰酸酯經(jīng)過硅膠柱層析分離后，得到純度為95%的苯乙基異硫氰酸酯。
　　采用響應(yīng)曲面法分析辣根硫代葡萄糖苷的熱提取工藝，當(dāng)溫度79℃，時間21 min，乙醇濃度81%時，硫代葡萄糖苷的含量為76μmol/g。采用比色法和氣相色譜法分析辣根水解產(chǎn)物中總糖含量和單糖組分，其中總多糖1