尼群洛爾片含量均勻度及β-受體激動(dòng)劑殘留物的毛細(xì)管電泳分析檢測(cè)研究.pdf

1、近年來(lái),我國(guó)藥品、食品安全事件頻頻發(fā)生,層出不窮的新型藥物制劑和食品添加劑為我國(guó)藥品、食品檢測(cè)增加了很大的難度。利用新型的檢測(cè)方法,高效、快速地對(duì)藥品進(jìn)行質(zhì)量控制以及對(duì)違法添加劑進(jìn)行檢測(cè)和監(jiān)控已成為當(dāng)務(wù)之急。毛細(xì)管電泳是近年來(lái)發(fā)展最快的分析技術(shù)之一,以其高效、快速、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)已在食品、環(huán)境、生物、制藥領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。本文基于毛細(xì)管電泳高效、快速、簡(jiǎn)單和低成本的特點(diǎn),對(duì)藥品、食品質(zhì)量控制進(jìn)行了應(yīng)用研究。全文由以下幾個(gè)部分組成。

2、　　引言部分分別介紹了毛細(xì)管電泳的分類、特點(diǎn)和近年來(lái)研究熱點(diǎn)和發(fā)展現(xiàn)狀,并在此基礎(chǔ)上提出課題的立題依據(jù)和研究?jī)?nèi)容。
　　第一章以膠束毛細(xì)管電色譜法建立了新型抗高血壓復(fù)方藥物——尼群洛爾片的快速檢測(cè)方法。實(shí)驗(yàn)使用 Box-Behnken設(shè)計(jì)輔助的響應(yīng)面優(yōu)化法對(duì)分析緩沖液的濃度、pH值和十二烷基硫酸鈉濃度進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化。在優(yōu)化后得到的最優(yōu)緩沖液配比為:30mmol·L-1 NaH2PO4-7.5mmol·L-1 Na2B4O7(pH8

3、.9)、15mmol·L-1十二烷基硫酸鈉。在最優(yōu)分析條件下,采用50μm內(nèi)徑30cm毛細(xì)管柱、分離電壓25kV、毛細(xì)管溫度25℃,可使樣品在3分鐘內(nèi)完成分離。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證,在尼群地平5-17.5μg·mL-1、阿替洛爾10-35μg·mL-1的濃度范圍內(nèi),線性良好(γ2>0.999);精密度<3％;尼群地平和阿替洛爾在添加濃度為5、10、17.5μg·mL-1和10、20、35μg·mL-1時(shí),回收率分別為98.98%-100.15%

4、和99.46%-101.18%;最低檢測(cè)限為:阿替洛爾:1μg·mL-1、尼群地平:0.5μg·mL-1;最低定量限為2.5μg·mL-1、尼群地平:1.5μg·mL-1。最后依據(jù)美國(guó)藥典,方法被應(yīng)用于5批片劑的含量均勻度測(cè)定。實(shí)驗(yàn)證明,MEKC法適用于尼群洛爾片的質(zhì)量控制,且與其他文獻(xiàn)相比分析速度更快。同時(shí),使用Box-Behnken設(shè)計(jì)可避免極端條件的應(yīng)用,適用于毛細(xì)管電泳分析條件的優(yōu)化。
　　第二章采用場(chǎng)放大結(jié)合酶解-液液萃

5、取建立了豬肉、豬肝和豬腎中氯丙那林、塞曼特羅、塞布特羅、克倫特羅、馬布特羅、苯乙醇胺A、福莫特羅、沙丁胺醇、特布他林、萊克多巴胺和班布特羅等11種β-受體激動(dòng)劑的快速篩選方法。在單變量初步優(yōu)化的基礎(chǔ)上,以 Box-Behnken設(shè)計(jì)輔助的響應(yīng)面優(yōu)化法對(duì)分析緩沖液的濃度、pH值和分離電壓進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化。在優(yōu)化后得到的最優(yōu)緩沖液配比為:40mmol·L-1 NaH2PO4-10mmol·L-1 Na2B4O7(pH6.9)。在最優(yōu)分析條件下

6、,采用75μm內(nèi)徑80cm毛細(xì)管柱、分離20kV、毛細(xì)管溫度25℃,可使樣品在11分鐘內(nèi)完成基線分離。采用50%乙腈、0.5psi7s水柱,可有效提高靈敏度10倍。方法的最低檢測(cè)限為:氯丙那林、塞曼特羅、塞布特羅、克倫特羅、馬布特羅、萊克多巴胺、班布特羅:0.5μg·kg-1;苯乙醇胺A、福莫特羅、沙丁胺醇:1μg·kg-1;特布他林:2μg·kg-1。最低定量限為:氯丙那林、塞曼特羅、塞布特羅、克倫特羅、馬布特羅、萊克多巴胺、班布特羅

7、:1.5μg·kg-1;苯乙醇胺A、福莫特羅、沙丁胺醇:2μg·kg-1;特布他林:5μg·kg-1。經(jīng)耐用性實(shí)驗(yàn)考察,緩沖液濃度配比在±10%浮動(dòng)下,檢測(cè)結(jié)果無(wú)顯著性差異。專屬性實(shí)驗(yàn)表明樣品基質(zhì)對(duì)目標(biāo)物出峰沒(méi)有干擾。本實(shí)驗(yàn)結(jié)合在線富集技術(shù)與合適的前處理技術(shù),可建立快速、高靈敏度的檢測(cè)方法,為實(shí)測(cè)樣品中β-受體激動(dòng)劑的測(cè)定奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　第三章在第二章的基礎(chǔ)上,對(duì)實(shí)測(cè)樣品(豬肉、豬肝和豬腎)中的氯丙那林、塞曼特羅、塞布特羅、克

8、倫特羅、馬布特羅、苯乙醇胺 A、福莫特羅、沙丁胺醇、特布他林、萊克多巴胺和班布特羅等11種β-受體激動(dòng)劑進(jìn)行了定量測(cè)定。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證,在10種β-受體激動(dòng)劑(除特布他林)2-200μg·kg-1、特布他林5-500μg·kg-1的范圍內(nèi),線性良好(γ2>0.995);精密度<12%;在10種β-受體激動(dòng)劑(除特布他林)在添加濃度為20μg·kg-1、特布他林添加濃度為50μg·kg-1時(shí),回收率為85-106%。專屬性實(shí)驗(yàn)表明樣品基質(zhì)對(duì)