一株抗白色假絲酵母菌的解淀粉芽孢桿菌的初步研究.pdf

1、芽孢桿菌次級代謝產(chǎn)物中的抑菌物質(zhì)主要是脂肽（lipopeptide）類化合物，主要包括表面活性素（surfactin）、伊枯草菌素（iturin）和豐原素（fengycin）3大類，它們通常具有抑制細菌、真菌、病毒以及支原體的作用，對由真菌或病毒引起的疾病的治療工作具有重要的研究意義。脂肽分子由親水的肽鏈和親油的脂肪烴鏈兩部分組成，正由于它的兩親性結(jié)構(gòu)特點，在食品工業(yè)、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等方面都有著廣泛的應用價值。
　　本論文從多株有

2、抑制真菌能力的菌株中篩選出抑菌活性最強的anti-CA菌株。通過對該菌株菌落形態(tài)鑒定以及16S rDNA序列分析，結(jié)果表明該菌株與解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）特征相符，并且16S rDNA序列具有高度的同源性，因此鑒定為解淀粉芽孢桿菌。anti-CA菌株能夠殺死人類條件致病菌白色假絲酵母菌（Candida albicans）。
　　通過對anti-CA菌株產(chǎn)抗菌活性物質(zhì)的培養(yǎng)條件優(yōu)化，確定

3、了該菌株產(chǎn)抗菌活性物質(zhì)的最佳培養(yǎng)條件為：豆餅粉2.0％（w/v），面粉1.0%（w/v），pH6.5，培養(yǎng)溫度28℃，180 rpm振蕩培養(yǎng)27 h。通過2-L發(fā)酵罐進行發(fā)酵實驗，結(jié)果表明anti-CA菌株發(fā)酵培養(yǎng)21 h時進入生長穩(wěn)定期，菌體量保持在3.3×108個/mL，發(fā)酵27 h時抗菌活性物質(zhì)抑菌效果達到最大，經(jīng)抑菌活性實驗檢測抑菌圈直徑為31.33mm，發(fā)酵時間為33 h時進入衰亡期。酶活力測定結(jié)果顯示淀粉酶活力可達110.7

4、5U/mL，蛋白酶活力可達到3.82U/mL，為以后anti-CA菌株工業(yè)化大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)抗菌活性物質(zhì)奠定了基礎(chǔ)。發(fā)酵上清液經(jīng)過酸沉淀、抽提，薄層層析和高效液相色譜法（HPLC）等步驟分離純化出一種抗菌脂肽。質(zhì)譜分析表明，此脂肽分子量為1021，分子式為C52H91N7O13。純化的抗菌脂肽在28℃，pH為7.0的抑菌檢測平板上對C. albicans抑菌活力最高。
　　對純化的anti-CA菌株抗菌脂肽的抑菌機理進行初步探究：純