疏水整體柱在線固相萃取食品中5種阿維菌素類藥物殘留的研究.pdf

1、目的：對于食品中阿維菌素類藥物殘留的監(jiān)測，在色譜分析之前，往往需要通過固相萃取前處理以去除雜質(zhì)、濃縮目標(biāo)物。為了克服傳統(tǒng)固相萃取離線操作自動化程度低、吸附劑難以重復(fù)使用等缺點，本論文建立一種可重復(fù)使用的疏水整體柱在線固相萃取結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS），同時、快速分析動植物源性食品中5種阿維菌素類藥物殘留的方法。
　　方法：1、通過原位聚合制備疏水聚（甲基丙烯酸丁酯-乙二醇二甲基丙烯酸酯）（poly（BMA-co-ED

2、MA））（10 mm×2.1 mm，id）整體柱，考察反應(yīng)時間（2~24 h）和反應(yīng)溫度（55~65℃）對整體柱疏水性能的影響，并對其通透性、機械強度和表面形貌進行表征。2、將最優(yōu)條件下制得的poly（BMA-co-EDMA）整體柱作為在線固相萃取吸附劑，用于動物源性（牛肉、牛肝和牛奶）和植物源性（鮮梨和辣椒）食品中5種阿維菌素類藥物殘留的前處理。實驗考察了在線固相萃取主要參數(shù)的影響，包括上樣流動相種類（5 mmol/L和10 mmol

3、/L乙酸銨緩沖溶液、0.1％和0.5%甲酸溶液）、洗脫流動相種類（甲醇、乙腈）和洗脫流速（0.3~0.8 mL/min）。3、經(jīng)poly（BMA-co-EDMA）整體柱富集凈化后的5種阿維菌素類藥物直接洗脫至C18分析柱進行液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析，實驗對分離流動相的種類（乙腈-0.5%甲酸溶液、乙腈-0.1%氨水溶液）、乙腈初始比例（80%~10%）以及質(zhì)譜條件進行了優(yōu)化。4、在最佳實驗條件下，測定基質(zhì)效應(yīng)、特異性、檢出限、定量限、線性范

4、圍和回收率等指標(biāo)。此外，通過同一根poly（BMA-co-EDMA）整體柱不同使用次數(shù)、以及相同批次和不同批次合成的整體柱對阿維菌素固相萃取得到的色譜峰峰面積計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，評價該吸附劑的使用壽命和重現(xiàn)性。
　　結(jié)果：1、實驗表明，在考察條件下，隨著反應(yīng)時間的增長和反應(yīng)溫度的提高，poly（BMA-co-EDMA）整體柱疏水作用無顯著變化。選擇整體柱合成條件為55℃水浴反應(yīng)4 h，該柱柱床均勻、連續(xù)多孔，其柱壓與操作流速呈現(xiàn)良好

5、線性關(guān)系（r=0.999）。2、將poly（BMA-co-EDMA）整體柱用作在線固相萃取吸附劑，實驗以10 mmol/L乙酸銨緩沖溶液為上樣流動相，在流速為0.5 mL/min條件下以乙腈為洗脫流動相將目標(biāo)物洗脫并轉(zhuǎn)移至C18分析柱。3、在LC-MS/MS分析時，為了獲得高靈敏度，選擇乙腈-0.1%氨水溶液為梯度洗脫流動相并確定乙腈初始比例為10%。4、方法對食品中5種阿維菌素類藥物殘留的分析時間為15 min，在1~100μg/L范

6、圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r≥0.995），對5種阿維菌素類藥物檢出限為2μg/kg，定量限為5μg/kg。在5.0、10.0、50.0μg/kg三個添加水平的回收率為71.8%~101.3%，日內(nèi)和日間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤8.94%。同一根整體柱第1次、第250次和第500次使用，阿維菌素色譜峰峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.4%；使用相同批次和不同批次合成的poly（BMA-co-EDMA）整體柱，得到阿維菌素色譜峰峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為6.3%和

7、9.3%。
　　結(jié)論：基于疏水整體柱在線固相萃取結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析，建立了動植物源性食品中5種阿維菌素類藥物殘留同時測定的方法，滿足食品中阿維菌素類藥物的常規(guī)分析測定要求。方法自動化程度高，在線測定提高了方法的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度；分析速度快，離線方法僅固相萃取就需要耗時2h以上，而本方法對食品樣品的前處理和分析測定過程總共只需15 min；疏水整體柱制備簡單，重復(fù)性良好，可達500次以上，并且對動植物源性食品均具有良好的富集凈化