牛奶中阿維菌素類(lèi)藥物殘留檢測(cè)——高效液相色譜法(sop)修改版-新

1、1牛奶中阿維菌素類(lèi)藥物殘留檢測(cè)牛奶中阿維菌素類(lèi)藥物殘留檢測(cè)—高效液相色譜法高效液相色譜法1安全要求安全要求該檢驗(yàn)的提取、凈化步驟應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，操作中需著工作服、戴口罩手套，避免溶劑氣體吸入和皮膚接觸；廢棄的化學(xué)試劑收集到專(zhuān)用容器集中處理。2急救措施急救措施皮膚觸到有機(jī)溶劑或酸用清水清洗，濺入眼中用純水灌洗。3適用范圍適用范圍該操作規(guī)程適用于牛奶中阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素殘留量的制樣及測(cè)定。4職責(zé)職責(zé)進(jìn)行該項(xiàng)檢驗(yàn)的檢驗(yàn)員必須按該操

2、作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)，質(zhì)量監(jiān)督員負(fù)責(zé)監(jiān)督該操作規(guī)程的正確執(zhí)行。5檢測(cè)原理檢測(cè)原理用乙腈提取試料中殘留的阿維菌素類(lèi)藥物，加水稀釋?zhuān)尤野肥谷芤撼嗜鯄A性，C18固相萃取柱凈化，加三氟乙酸酐和N甲基咪唑衍生化。高效液相色譜熒光檢測(cè)法測(cè)定，外標(biāo)法定量。6方法靈敏度方法靈敏度本方法在牛奶中阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素的檢測(cè)限均為1gkg，定量限均為2gkg。7注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)7.1整個(gè)凈化步驟控制C18柱流速約在1～2mLmin；7.2C18柱使用過(guò)

3、程中除特別說(shuō)明外，應(yīng)避免柱床干涸。8材料、儀器、試劑的準(zhǔn)備及基本要求材料、儀器、試劑的準(zhǔn)備及基本要求38.20離心機(jī)8.21渦旋混合儀8.22聚丙烯離心管50mL8.23氮吹儀8.24C18固相萃取柱500mg6cc，或相當(dāng)者8.25微孔濾膜0.45m9檢驗(yàn)步驟檢驗(yàn)步驟9.1試料的制備9.1.1取混勻后的供試樣品，作為供試試料。9.1.2取混勻后的空白樣品，作為空白試料（陰性對(duì)照）。9.1.3取混勻后的空白樣品5g添加1gmL的工作液0

4、.05mL，作為空白添加試料。9.2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密量取1gmL阿維菌素類(lèi)藥物混合標(biāo)準(zhǔn)工作液0.02、0.05、0.1mL，于10mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度；精密量取10gmL阿維菌素類(lèi)藥物混合標(biāo)準(zhǔn)工作液0.25mL，于50mL量瓶中，0.1、0.3mL至10mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，配制成濃度分別為2、5、10、50、100、300ngmL的阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，各取1.0mL于各自的10mL試管中，于

5、50℃水浴氮?dú)獯蹈桑囱苌襟E處理后，將系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，供高效液相色譜測(cè)定，從低濃度到高濃度依次測(cè)定，每一濃度進(jìn)樣3針。以測(cè)得峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。求回歸方程和相關(guān)系數(shù)。9.3提取9.2.1稱(chēng)取(50.05)g試料，于50mL離心管中，加乙腈8mL，渦旋混勻，中速振蕩5min，5000rmin離心10min。9.2.2收集上清液于另一50mL離心管中。殘?jiān)僦貜?fù)提取一次。9.2.3合并兩次上清液，加水