食品中阿維菌素類藥物酶聯(lián)免疫檢測方法的研究.pdf

1、本論文對阿維菌素類藥物的酶聯(lián)免疫分析方法進(jìn)行了研究。
　　 將阿維菌素進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造制備半抗原，先用叔丁基二甲基氯硅烷將C5-OH選擇性保護(hù)，進(jìn)一步用琥珀酸酐將C4”-OH琥珀酰化，最后脫去保護(hù)基，合成出阿維菌素特異性半抗原。利用活化酯法將半抗原與載體蛋白BSA偶聯(lián)制備免疫抗原，采用NHS法將半抗原與OVA偶聯(lián)制備包被原。通過免疫新西蘭大白兔獲得高親和性的抗體，該抗體對阿維菌素類藥物有較高的交叉反應(yīng)，阿維菌素為100％，埃普里諾菌

2、素為123％，伊維菌素為21.9％。
　　 以此抗體為基礎(chǔ)，通過條件優(yōu)化建立酶聯(lián)免疫檢測方法，可同時檢測食品中阿維菌素類藥物殘留。此法靈敏度較高，阿維菌素靈敏度IC50為1.92±0.3 ng/mL，檢測限IC15為0.13±0.03 ng/mL；伊維菌素IC50為8.75±0.5 ng/ML，IC15為＝0.55±0.05 ng/mL；埃普里諾菌素IC50為1.56±0.3ng/mL，IC15為0.10±0.02 ng/mL。

3、在對實際樣品進(jìn)行檢測的研究中，選取了牛肉、豬肉、豬肝、梨作為主要研究對象考察了他們的基質(zhì)影響及去除方法。在方法的準(zhǔn)確性實驗中，在10、40、100μg/kg三個加標(biāo)水平上，間接競爭酶聯(lián)免疫檢測方法的回收率在75.20％-89.78％。
　　 應(yīng)用高效液相色譜檢測方法，對建立的阿維菌素間接競爭ELISA檢測方法的準(zhǔn)確性進(jìn)行了驗證，兩種方法所得結(jié)果的線性相關(guān)系數(shù)R2值為0.9862。
　　 通過上述內(nèi)容的研究，所建立的ELJ