交通相關(guān)細(xì)顆粒物對(duì)CEM-6T細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、第一部分交通相關(guān)細(xì)顆粒物對(duì)CEM-6T CEM-6T CEM-6T CEM-6T細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用
　　 目的:探討交通相關(guān)細(xì)顆粒物污染對(duì)CEM-6T細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。
　　 方法:四甲基偶氮唑蘭(MTT）比色法測(cè)定交通相關(guān)細(xì)顆粒物對(duì)CEM-6T細(xì)胞增殖功能的影響；AO/EB 熒光探針觀察PM2.5作用下CEM-6T細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變；FITC-AnnexinV/PI 染色流式細(xì)胞儀測(cè)定交通相關(guān)細(xì)顆粒物染毒CEM-6T細(xì)

2、胞的早期凋亡和壞死；RT-PCR 測(cè)定CEM-6T細(xì)胞caspase-3的mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果:160(48h 除外)、320、800μg/mLPM2.5 染毒細(xì)胞24h和48h 可抑制細(xì)胞增殖功能，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）；AO/EB 染色法發(fā)現(xiàn)，被染成紅色的晚期凋亡和壞死細(xì)胞隨著染毒劑量增加逐漸增多；經(jīng)FITC-Annexin V/PI 染色流式細(xì)胞儀測(cè)定，320μg/mLPM2.5 染毒細(xì)胞24h

3、后，細(xì)胞早期凋亡比生理鹽水組升高，20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細(xì)胞48h，細(xì)胞早期凋亡比生理鹽水組升高，320μg/mL PM2.5 染毒細(xì)胞24h和48h，細(xì)胞壞死比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）；20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細(xì)胞24h和48h，細(xì)胞caspase-3 比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:

4、交通相關(guān)的細(xì)顆粒物對(duì)CEM-6T細(xì)胞增殖功能有抑制作用，可誘導(dǎo)CEM-6T細(xì)胞凋亡。
　　 第二部分交通相關(guān)細(xì)顆粒物誘導(dǎo)CEM-6T CEM-6T CEM-6T CEM-6T細(xì)胞凋亡機(jī)制的探討
　　 目的:探討交通相關(guān)細(xì)顆粒物誘導(dǎo)CEM-6T細(xì)胞凋亡機(jī)制。
　　 方法:線粒體途徑的測(cè)定，羅丹明123 法檢測(cè)交通相關(guān)細(xì)顆粒物染毒CEM-6T細(xì)胞線粒體膜電位的改變用，Western Blot測(cè)定交通相關(guān)細(xì)顆粒物染毒C

5、EM-6T細(xì)胞Caspase-9、Cyt-c蛋白表達(dá)；死亡受體途徑的測(cè)定，Western Blot測(cè)定交通相關(guān)PM2.5 染毒CEM-6T細(xì)胞Fas-L、Caspase-8、TNF-α蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果:160、320μg/mLPM2.5 染毒細(xì)胞24h與80、160、320μg/mLPM2.5 染毒48h細(xì)胞線粒體膜電位均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）；20(48h 除外)、80、320μg/mL PM2.5

6、染毒細(xì)胞24h和48h，Cyt-c/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細(xì)胞24h和48h，細(xì)胞Caspase-9/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。20μg/mL (48h 除外)、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細(xì)胞24h和48h，細(xì)胞Fas-L/β-actin灰度比值

7、比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒細(xì)胞24h和48h，細(xì)胞Caspase-8/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。20μg/mL (48h 除外)、80μg/mL、320μg/mL PM2.5 染毒細(xì)胞24h和48h，細(xì)胞TNF-α/β-actin 灰度比值比生理鹽水組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:線