抗血小板藥依諾格雷的合成方法研究.pdf

1、血栓性疾病是嚴重威脅人類健康的疾病之一，具有很高的發(fā)病率和致殘率。盡管臨床上防治血栓的藥物有很多，但血栓性疾病依然是人們死亡的主要原因。目前，抗血栓藥物的研究與開發(fā)是各國政府的一項首要任務。隨著分子生物學的發(fā)展，人們對血栓形成機制有了更好的理解，為尋找新的抗血栓藥物奠定了堅實的基礎。
　　血小板在血栓的形成過程中發(fā)揮著十分重要的作用。當血管內(nèi)皮損傷以后，血管內(nèi)皮下膜暴露出來，這會導致血小板黏附、活化和聚集。血小板的活化過程受到不同

2、受體介導的多種信號通路的調(diào)控，這些受體可以被相應的受體激動劑激活。二磷酸腺苷(ADP)是一種非常重要的血小板受體激動劑，在血小板質(zhì)膜表面有兩種ADP受體亞型：P2Y1受體和P2Y12受體，兩者均屬于G蛋白偶聯(lián)受體。P2Y1受體被ADP激活后，可以誘導血小板變形，促進Ca2+內(nèi)流進入血小板，加快血小板的可逆性聚集。P2Y12受體被ADP激活后可抑制腺苷酸環(huán)化酶，降低血小板內(nèi)環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的水平，促進血小板聚集[1]。血小板的激活受

3、P2Y1受體和P2Y12受體共同調(diào)控，兩者缺一不可。研究發(fā)現(xiàn)，P2Y12受體主要存在于血小板表面，其他組織器官中分布很少，這就意味著P2Y12受體拮抗劑主要作用于血小板而對機體其他細胞和組織作用很弱，故副作用比較少，目前已是國內(nèi)外抗血小板藥物研究的焦點。
　　依諾格雷(Elinogrel)是由瑞士諾華(Novartis)公司和美國波托拉制藥(Portola Pharmaceuticals)公司共同研制的一種強效可逆性的P2Y12受

4、體拮抗劑。依諾格雷在體內(nèi)可以直接發(fā)揮抗血小板作用，不需經(jīng)過肝臟代謝，既可以口服又可以靜脈注射，在結(jié)構(gòu)上它屬于三磷酸腺苷(ATP)類似物。Ⅱ期臨床試驗結(jié)果顯示，依諾格雷與氯吡格雷相比起效快、作用強，患者對藥物的變異反應少，且不會增加出血危險[2]。依諾格雷是一個非常有潛力的抗血小板藥，目前，已完成Ⅱ期臨床試驗[3]。
　　目的：
　　合成P2Y12受體拮抗劑依諾格雷(Elinogrel)及其鉀鹽，并對合成工藝進行優(yōu)化。

5、　　方法：
　　以3,4-二氟苯甲酸為起始原料，經(jīng)過硝化、酯化、硝基還原，得到化合物2-氨基-4,5-二氟苯甲酸甲酯(7)。用二碳酸二叔丁酯(Boc2O)對4-硝基苯胺的氨基進行保護，然后經(jīng)10％ Pd/C催化氫化將硝基還原為氨基，得到中間體(4-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯(10)。以干燥的1,2-二氯乙烷為溶劑，中間體7與三光氣(BTC)反應生成2-異氰酸基-4,5-二氟苯甲酸甲酯(11)，11與10反應生成化合物2-[N'-[4

6、-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基]脲基]-4,5-二氟苯甲酸甲酯(12)?；衔?2在甲醇鈉甲醇溶液中進行環(huán)合反應，得到化合物 N-[4-(6,7-二氟-1,4-二氫-2,4-二氧代-3(2H)-喹唑啉基)苯基]-氨基甲酸叔丁酯(13)，13在氯化氫-乙醇溶液中脫去氨基保護基得到3-(4-氨基苯基)-6,7-二氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮鹽酸鹽(14)。14與甲胺發(fā)生親核取代反應，得到中間體3-(4-氨基苯基)-6-氟-7-(甲基氨

7、基)-2,4(1H,3H)-喹唑啉二酮(15)。2-氯噻吩與氯磺酸和五氯化磷反應生成5-氯-2-噻吩磺酰氯(17)，再經(jīng)濃氨水氨化得到5-氯-2-噻吩磺酰胺(18)，化合物18與氯甲酸乙酯在堿性條件下反應生成中間體[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠氨基甲酸乙基酯(19)。中間體19與15反應得到目標化合物5-氯-N-[[[4-[6-氟-7-(甲基氨基)-1,4-二氫-2,4-二氧代-3(2H)-喹唑啉基]苯基]氨基]羰基]-2-噻吩磺酰胺

8、(2)，即依諾格雷。化合物2與氫氧化鉀反應得到5-氯-N-[[[4-[6-氟-7-(甲基氨基)-1,4-二氫-2,4-二氧代-3(2H)-喹唑啉基]苯基]氨基]羰基]-2-噻吩磺酰胺鉀鹽(1)，即依諾格雷鉀鹽[4,5]。最后，用高效液相色譜法(HPLC)分別對目標物依諾格雷和依諾格雷鉀鹽的含量進行測定。
　　結(jié)果：
　　按照設計的路線合成了依諾格雷及其鉀鹽，并通過1H-NMR和MS-ESI(m/z)對結(jié)構(gòu)進行了初步確認。另外