高產(chǎn)木聚糖酶嗜熱真菌的篩選、固態(tài)發(fā)酵條件及酶學(xué)性質(zhì)的初步研究.pdf

1、木聚糖酶是一種主要的非淀粉多糖酶，他可以將主鏈由木糖殘基以β-1.4鍵連接而成，約占植物碳水化合物1/3的木聚糖降解成低聚糖和木糖，從而消除木聚糖帶來的不利影響或?qū)崿F(xiàn)對木聚糖的綜合利用。在工業(yè)化實際應(yīng)用中常要求木聚糖酶具有較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性，常溫木聚糖酶不能滿足這一要求，耐高溫木聚糖酶更有應(yīng)用前景。
　　 在自然情況下耐高溫木聚糖酶多由嗜熱菌分泌產(chǎn)生，且真菌的產(chǎn)酶量通常遠(yuǎn)大于細(xì)菌的產(chǎn)酶量，所以本實驗集中篩選能高產(chǎn)木聚糖酶的嗜熱真菌。

2、實驗室從廣西各地和海南島廣泛采集森林土壤樣品和堆肥樣品多份，以自制木聚糖為唯一碳源，從土壤中篩選到一株高產(chǎn)木聚糖酶菌株QS-7-2-4，綜合形態(tài)觀察和分子鑒定的方法最終該菌株鑒定為嗜熱子囊菌(Thermoascusaurantiacus)。
　　 對該菌株進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)木聚糖酶條件優(yōu)化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)最佳產(chǎn)酶條件為：玉米芯：麩皮為7:3，250mL三角瓶裝料量為8g，最佳培養(yǎng)溫度為50℃，吐溫-80添加量為0.5％，最佳氮源為細(xì)菌學(xué)蛋

3、白胨：胰蛋白胨的比例為1:1，總添加量為1.5％，培養(yǎng)基初始含水量為80％，培養(yǎng)72h木聚糖酶活即可達(dá)到最大值27952IU/g干基碳源。浸提酶液，對酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行初步的研究，該酶的最適反應(yīng)溫度為75℃，且在該溫度下酶活穩(wěn)定，在75℃下保溫1h后還有90.92％的殘余酶活，在40℃～70℃下保溫1h酶活基本沒有損失，在80℃下的半衰期為28min，該酶的最適反應(yīng)pH為4.8，在4.0～6.5pH范圍內(nèi)有著較高的酶活力，該酶為偏酸性酶且耐酸