發(fā)芽蠶豆γ-氨基丁酸富集與調控技術研究.pdf

1、本研究采用低氧和NaCl聯(lián)合脅迫方式處理蠶豆（啟豆-2號），優(yōu)化了發(fā)芽蠶豆富集GABA的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)液組分，分析了添加氨基胍（DAO抑制劑）后，發(fā)芽蠶豆不同部位DAO活性、GABA及前提物含量變化，探明多胺降解途徑對發(fā)芽蠶豆富集GABA的貢獻率。研究Ca2+對發(fā)芽蠶豆GABA富集的影響，并在優(yōu)化的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)液培養(yǎng)下，考察了蠶豆發(fā)芽過程中主要生理生化指標和GABA含量的變化，以及GABA合成關鍵酶、相關底物的變化情況。主要研究結果如

2、下:
　　 1、低氧聯(lián)合NaCl脅迫下，培養(yǎng)時間、培養(yǎng)液pH和脅迫時間顯著影響發(fā)芽蠶豆γ-氨基丁酸(GABA)積累。蠶豆發(fā)芽富集GABA最佳培養(yǎng)條件為:正常培養(yǎng)時間1.5d、培養(yǎng)液pH3.5和脅迫時間4d。MSG（谷氨酸鈉）、CaCl2和VB6對發(fā)芽蠶豆GAD及GABA的影響均達到顯著水平（P＜0.05）。蠶豆富集GABA的最適培養(yǎng)液組分為MSG1.1 mg/mL、CaCl26.1 mmol/L和VB672μmol/L，此時，G

3、ABA富集量達到1.98±0.09 mg/g DW，為對照的1.83倍。
　　 2、低氧聯(lián)合NaCl脅迫下，用AG處理發(fā)芽1.5 d的蠶豆，其芽長、DAO活性和GABA含量均受到顯著抑制。當AG濃度為5mmol/L時，隨著處理時間的延長，蠶豆生長發(fā)育、DAO活性、GABA含量均低于對照。低氧聯(lián)合NaCl脅迫條件下蠶豆子葉和胚中GABA富集量分別有25.0％和29.3％由多胺降解途徑提供。
　　 3、低氧聯(lián)合NaCl脅迫下

4、，CaCl2處理顯著提高了發(fā)芽蠶豆子葉中GAD和DAO活性，使子葉中GABA含量比對照增加24.4％，而胚（非子葉部分）中GABA含量變化不顯著。添加EGTA后，蠶豆子葉和胚中DAO活性均顯著受到抑制，GABA含量明顯降低。
　　 4、低氧聯(lián)合NaCl脅迫條件下，添加MSG、CaCl2和VB6使蠶豆生長速度變慢，呼吸作用加強，發(fā)芽期間，淀粉含量降低，還原糖、可溶性蛋白和游離氨基酸等含量增加，GAD和DAO活性升高，GABA含量隨