促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療脊髓損傷的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合應(yīng)用對大鼠脊髓損傷修復(fù)的影響.
　　 方法：
　　 將80只SD大鼠隨機(jī)分成手術(shù)對照組(簡稱對照組，n=15)、促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin，EPO)治療組(簡稱EPO組，n=15)、大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)治療組(簡稱BMSCs組，n=25)和BMSCs聯(lián)合EPO治療組(簡稱聯(lián)合組，n=25)。造模后第7天EPO組經(jīng)腹腔注射促紅細(xì)胞

2、生成素，而BMSCs組、聯(lián)合組則經(jīng)損傷脊髓局部注射BMSCs和局部注射BMSCs的同時加用EPO腹腔注射。移植后第3d、1w、3w，BMSCs組、聯(lián)合組兩組分別應(yīng)用雙標(biāo)免疫熒光法檢測5-溴-2脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)標(biāo)記BMSCs的神經(jīng)元中絲蛋白(NF-M)的表達(dá)情況，移植后第3周各組取脊髓組織作HE病理切片染色，再用免疫組化觀察神經(jīng)元中絲蛋白(NF-M)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)情況，每個時間點取5只大鼠，移植后第1d、1

3、w、2w、3w和4w，各組選10只大鼠分別用(BassoBeattie Bresnahan，BBB)法檢測大鼠神經(jīng)功能的恢復(fù)情況。所得數(shù)據(jù)采用組間均數(shù)比較t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　 結(jié)果：
　　 1、脊髓病理切片顯示聯(lián)合組較BMSCs組膠質(zhì)細(xì)胞增生更加活躍，炎性細(xì)胞浸潤和組織水腫顯著減輕。
　　 2、雙標(biāo)免疫熒光結(jié)果顯示移植的BMSCs在宿主脊髓中存活，從第7天開始就有NF-M表達(dá)。免疫組化結(jié)果顯示聯(lián)合組中NF

4、-M和GFAP陽性細(xì)胞數(shù)目均比其余組多(P<0.05)。
　　 3、治療組脊髓損傷修復(fù)較對照組明顯，神經(jīng)功能BBB評分也明顯提高(P<0.05)。
　　 4、聯(lián)合組在不同的時間點神經(jīng)功能BBB評分都較EPO組、BMSCs組高。
　　 結(jié)論：
　　 1、BMSCs移植與EPO腹腔注射是治療大鼠脊髓損傷的有效方法；
　　 2、促紅細(xì)胞生成素在體內(nèi)有誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的能力。
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